自然杀伤细胞分离、培养方法的建立

来源 :中华细胞与干细胞杂志(电子版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:lhm136
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目的建立自然杀伤细胞(NK)的分离、培养方法,并检测其杀伤活性。方法抽取健康人外周血20ml,采用淋巴分离液分离单个核细胞,再用苯丙氨酸甲酯(PME)去除单核巨噬细胞、B细胞,从而纯化单个核细胞。培养3~5h,收集黏附于培养板底部表面的细胞(即A-NK细胞),重新培养2周。实验过程中用显微镜观察细胞形态,用流式细胞术检测标志性抗原,用MTT法检测杀伤率。结果单个核细胞在诱导的第3天开始出现集落,第7天时集落达到高峰。流式细胞术检测第7天的表面抗原,CD3-为96.5﹪,CD3-中CD16+和CD56+双阳
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