【摘 要】
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目的 探讨绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)患者腹膜纤维化的防治作用及其机制.方法 培养人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs),分别以0、12.5、25、50、100μmol/L的EGCG对HPMCs进行预处理后,采用晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)诱导建立上皮-间充
【机 构】
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湖南省直中医院肾内科,湖南 长沙 410000;长沙市第四医院肾内科,湖南 长沙 410006
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目的 探讨绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)患者腹膜纤维化的防治作用及其机制.方法 培养人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs),分别以0、12.5、25、50、100μmol/L的EGCG对HPMCs进行预处理后,采用晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)诱导建立上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)模型,将未做任何处理的细胞作为对照组.采用MTT法分析EGCG对HPMCs增殖的影响;划痕实验法分析EGCG对HPMCs迁移的影响;蛋白质免疫印迹法检测HPMCs上皮细胞分子标志蛋白(Snail、E-cadherin、CK、ZO-1)和间质细胞分子标志蛋白(α-SMA、FSP1)表达水平;上皮跨膜细胞电阻仪检测EGCG对HPMCs跨细胞电阻(transcellular resistance,TER)的影响.结果 与对照组比较,EMT模型组的细胞活力明显增加,Snail、E-cadherin、CK和ZO-1蛋白表达水平降低,α-SMA和FSP1蛋白表达水平升高,TER值增加(P<0.05);EGCG可以剂量依赖性地减少HPMCs细胞活力,抑制HPM-Cs细胞迁移,增加Snail、E-cadherin、CK和ZO-1蛋白表达水平,减少α-SMA和FSP1蛋白表达水平,降低TER值(P<0.05).结论 EGCG可有效抑制HPMCs增殖和迁移,并通过上调上皮细胞分子标志蛋白表达,下调间质细胞分子标志蛋白表达,增加HPMCs通透性,抑制HPMCs的EMT,延缓腹膜纤维化,具有临床应用价值.
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