VIM-2型金属β内酰胺酶的序列分析、原核表达及纯化

来源 :中国感染与化疗杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：limeijian168

【摘要】

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目的对铜绿假单胞菌所产blaVIM-2进行基因重组表达及纯化。方法以产blaVIM-2铜绿假单胞菌总基因组DNA为模板，PCR扩增blaVIM-2，将其克隆入pUCm-T载体后测定该核苷酸序列，再将blaV

【作者】

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林孟娴王佩芬蔡应木钱元恕

【机构】

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汕头大学医学院药理教研室,汕头大学医学院第一附属医院检验科

【出处】

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中国感染与化疗杂志

【发表日期】

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2006年3期

【关键词】

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VIM-2型金属β内酰胺酶克隆原核表达及纯化铜绿假单胞菌 VIM-2 metallo-β-lactamase Clone Prokaryotic ex

【基金项目】

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国家自然科学基金（编号：30472109）,广东省自然科学基金（编号：34616）,汕头大学研究与发展基金（编号：L00010）.

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目的对铜绿假单胞菌所产blaVIM-2进行基因重组表达及纯化。方法以产blaVIM-2铜绿假单胞菌总基因组DNA为模板，PCR扩增blaVIM-2，将其克隆入pUCm-T载体后测定该核苷酸序列，再将blaVIM-2克隆入表达载体pET-41b（＋），然后在大肠埃希菌BL21（DE3）中表达，表达产物再过Ni-NTA柱纯化。结果PCR扩增出大小为801bp的基因片段，与GenBank上同类酶的基因序列同源性为100％。此基因能在大肠埃希菌中大量表达，蛋白分子质量大约为56000u。结论对VIM-2金属酶的成

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