硫酸酯化防风多糖通过CCL3影响乳腺癌细胞MCF-7对巨噬细胞的募集和驯化作用

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目的探讨经超声提取的防风多糖(USPS)进行硫酸酯化修饰后对人乳腺癌MCF-7细胞体外增殖的抑制作用以及对肿瘤相关巨噬细胞募集和驯化的影响。方法 (1)采用氯磺酸-吡啶法对USPS进行硫酸酯化修饰得到硫酸酯化USPS(S-USPS)。(2)采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定USPS和S-USPS在不同给药浓度下对MCF-7细胞生长的抑制作用。(3)体外诱导生成THP-1来源的巨噬细胞,采用Transwell法检测S-USPS作用上清对巨噬细胞募集的影响。(4)采用qRT-PCR和ELISA法检测S-USPS对MCF-7细胞趋化因子表达和分泌的影响。(5)采用qRT-PCR法检测S-USPS、CCL3对巨噬细胞促炎和抗炎因子表达的影响。结果 (1)与USPS相比,S-USPS体外可明显抑制MCF-7细胞的增殖活性(P <0. 05),且抑制率呈剂量和时间依赖性。(2)S-USPS可显著促进MCF-7细胞趋化因子3(CCL3)的转录和分泌。(3)与空白对照和MCF-7细胞上清组相比,S-USPS可上调巨噬细胞白介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α) mRNA的表达,同时下调转化生长因子β(TGF-β)、IL-10 mRNA的表达(P <0. 05)。(4)向MCF-7条件培养基中加入CCL3中和抗体,可显著逆转S-USPS对IL-1β、TNF-α表达的促进作用(P <0. 05)。结论硫酸酯化防风多糖可通过作用于CCL3促使MCF-7细胞对巨噬细胞的募集作用,并驯化巨噬细胞向M1型分化。
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