论文部分内容阅读
目的：构建大容量人源 Fab 噬菌体库，筛选并鉴定抗CD276的特异性抗体。方法通过采集10位健康成人的外周血淋巴细胞，提取总RNA，利用 RT-PCR 扩增人 Fab 抗体基因片段，插入噬菌体载体 pCANTAB5H 中，构建人源 Fab 噬菌体抗体库。通过固相化的抗原对抗体库进行3轮筛选后，随机挑取96个单克隆进行 phage-ELISA 鉴定，筛选出与抗原具有较强结合性的噬菌体克隆。结果成功构建库容为5×10^10的噬菌体抗体库，从中筛选到11株阳性克隆，对其进行测序鉴定，表明该11株克隆