犀角地黄汤合银翘散通过促进流感病毒感染的小鼠巨噬细胞自噬而降低线粒体ROS水平

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bsqtld0
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目的:探究犀角地黄汤合银翘散(XDY)对自噬调节的流感病毒感染小鼠巨噬细胞线粒体活性氧(mtROS)水平的影响.方法:以流感病毒PR8感染小鼠巨噬细胞J774A.1为模型,进行下列实验:(1)分为正常组、模型组(PR8感染24 h)、XDY干预组(PR8感染及162.5 mg/L XDY干预24 h)、3-甲基腺嘌呤(3-MA)干预组(5 mmol/L 3-MA预处理3 h+PR8感染24 h)、3-MA对照组(5 mmol/L 3-MA预处理3 h再继续培养24 h)和PR8+3-MA+XDY组(5 mmol/L 3-MA预处理3 h+PR8感染及162.5 mg/L XDY干预24 h),Western blot法检测细胞微管相关蛋白1轻链3-II(LC3-II)和P62蛋白水平,ELISA检测细胞培养上清液白细胞介素1β(IL-1β)的分泌水平;(2)分为正常组、模型组和XDY干预组,免疫荧光观察细胞线粒体膜电位、自噬体与线粒体共定位;(3)分为正常组、模型组、XDY干预组、Mito-TEMPO干预组(PR8感染及500μmol/L Mito-TEMPO干预24 h)、Mito-TEMPO对照组(500μmol/L Mito-TEMPO干预24 h)、3-MA干预组、3-MA对照组和PR8+3-MA+XDY组,流式细胞术检测mtROS水平.结果:流感病毒感染后,J774A.1细胞内LC3-II和P62蛋白水平显著升高,线粒体膜电位下降,mtROS生成增多,IL-1β分泌显著增多;与模型组相比,XDY可降低P62的表达,促进线粒体自噬,升高线粒体膜电位,减少mtROS产生及IL-1β分泌;以3-MA抑制细胞自噬可加重mtROS累积,XDY降低mtROS的作用也受到抑制.结论:XDY可通过促进流感病毒感染的小鼠巨噬细胞自噬而降低mtROS水平,从而抑制炎症反应.
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目的:基于N-α-乙酰基转移酶D(NATD)/叉头框蛋白A2(FOXA2)信号通路探讨其对乳腺癌转移的作用机制.方法:对不同转移能力的乳腺癌细胞系(人细胞系MDA-MB-231及其对肺转移衍生物LM2、MCF10CA1h及其转移性等基因系MCF10CA1a)进行了质谱组学分析.构建NATD过表达和敲减的MDA-MB-231和LM2细胞模型,并通过尾静脉注射到小鼠体内.在不同时点使用生物发光成像测量了肺转移负担.通过高通量反相蛋白质阵列和RNA免疫沉淀测序(RIP-Seq)分析鉴定NATD靶标.对于救援实验