表达抑制山羊痘病毒ORF095 shRNA的山羊成纤维细胞系的建立

来源 :甘肃农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ljc20090204

【摘要】

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将已经通过体外验证能够有效抑制山羊痘病毒复制的shRNA转入山羊体细胞,构建其表达细胞系.将已经通过验证能够靶向抑制山羊痘病毒ORF095基因并有效抑制GTPV的pGPU6/GFP-ORF09

【作者】

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赵志荀吴国华颜新敏许丹李健朱海霞崔力凡高顺平

【机构】

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甘肃农业大学动物医学院,中国农业科学院兰州兽医研究所,西北农林科技大学动物医学院

【出处】

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甘肃农业大学学报

【发表日期】

：

2012年2期

【关键词】

：

山羊痘病毒 pGPU6/GFP-shRNA G418 细胞系 RT-PCR goatpox virus pGPU6/GFP-shRNA G418 cell l

【基金项目】

：

农业部转基因生物新品种培育重大专项（2009ZX08008-010B）, 国家自然基金（31001056）

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将已经通过体外验证能够有效抑制山羊痘病毒复制的shRNA转入山羊体细胞,构建其表达细胞系.将已经通过验证能够靶向抑制山羊痘病毒ORF095基因并有效抑制GTPV的pGPU6/GFP-ORF095-siRNA-70转染山羊原代成纤维细胞,经800μg/mL G418抗性筛选7～8d后,用含200μg/mL G418和10～15ng/mL EGF的培养基进一步单克隆化并将单克隆细胞扩大、传代培养,应用RT-PCR检测及测序鉴定所构建的细胞系.结果表明：本试验获得的1株成纤维细胞系基因组含有ORF095-siR

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