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摘 要：以台湾牡丹樱花当年新生枝条为原材料，采集生長健壮的枝条腋芽（侧芽）建立诱导、增殖、生根、出棚驯化的台湾牡丹樱花快繁体系。结果表明：采集3月中旬至4月初的当年生枝条最为适宜;外植体消毒时间11 min，污染率最低，诱导率最高;最适的诱导培养基：MS+1.5 mg/L BA+0.1 mg/L IBA+30 g糖;继代培养：MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA+30 g糖，增殖系数2.04;生根培养：1/2MS+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA+15 g糖+1 g AC，生根率为83.21%;移栽采用基质：泥炭土∶珍珠岩∶草木灰=5∶3∶2，移栽成活率最高，达到87%。
关键词：台湾牡丹樱花;快繁体系;建立;驯化技术
文章编号： 1005-2690（2020）10-0003-02 中图分类号： S685.99 文献标志码： B
牡丹樱花原产我国台湾省，又名台湾牡丹樱，花深红色、重瓣，花量大，盛花时红花满树、花团锦簇，是最具发展潜力的樱花新品种之一。牡丹樱花属蔷薇科落叶乔木，伞状树型，花先叶开放，花下垂，萼筒钟状;花瓣深红色，不完全开展，呈半开状;花朵授粉后，雌蕊留存，萼筒与花瓣自然脱落，花梗、萼筒均无毛，花期2月初至3月初;幼枝绿色，被短柔毛，不久脱落，老枝紫红色。
台湾牡丹樱花颜色鲜艳亮丽，是早春重要的观花树种，可用于观赏园林;也可种植于山坡、路边、建筑物前;还可以群植，造成“花海”景观，具有很好的园林观赏价值[1-4]。
1 材料与方法
1.1 材料选取
3月下旬至4月中旬，从沙淤园区采集生长健壮、无病虫害、花型优美的当年生半木质化台湾牡丹樱花枝条为试验外植体。
1.2 试验方法
以MS、1/2MS为基本培养基，调节培养基pH值为5.6，琼脂粉6.5 g/L，蔗糖1.5%～3%，配以植物激素BA、IBA、NAA，以及AC和基质土。
1.2.1 外植体获取
采摘前1 d用多菌灵消毒液喷洒枝条，于次日晴天中午采集消毒过的健壮新生枝条，于实验室待处理。用饱和洗衣粉液配以软毛刷洗刷干净枝条，用流水冲洗1 h。后剪切为1～2 cm带芽小段，放置于超净工作台中备用。
在超净工作台中用75%酒精浸泡1 min，无菌水冲洗3次，每次4 min。用0.1%升汞浸泡，以不同的消毒时间（8 min、11 min、15 min）处理外植体，用无菌水冲洗4次，每次4 min。
1.2.2 诱导培养
以MS为基本培养基，添加不同浓度的BA（0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.5 mg/L、2.0 mg/L）、IBA（0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.15 mg/L），共计12组，每组重复3次，每次40瓶，每瓶1个外植体。
1.2.3 继代培养
以诱导培养的芽体为原材料。以MS为基本培养基，添加不同浓度的BA（0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.5 mg/L）、NAA（0.05 mg/L、0.1 mg/L），共计6组，每组重复1次，每次40瓶，每瓶5个新芽。
1.2.4 生根培养
以继代培养的继代苗为原材料（2～3片叶、2～3 cm高）。以1/2MS为基本培养基，添加不同浓度的IBA（0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.5 mg/L）、NAA（0.5 mg/L、1.0 mg/L）、AC 1 g，共6组，每组重复1次，每次40瓶，每瓶5个继代苗。
1.2.5 室外移栽
选取生长健壮的生根苗，移出培养室，在室外驯化21 d，开瓶炼苗3 d，在不同配比的基质上移栽（泥炭土∶珍珠岩∶蛭石=5∶3∶2、泥炭土∶珍珠岩∶草木灰=5∶3∶2、泥炭土∶蛭石∶草木灰=5∶3∶2），共计3个处理，每个处理2 000株，分别于7 d、30 d统计存活率。
2 结果与分析
2.1 外植体获取
外植体升汞消毒分3组对照，分别计算污染率、存活率、死亡率。消毒8 min，污染率43.15%、存活率48.35%、死亡率8.50%;消毒11 min，污染率30.17%、存活率55.33%、死亡率14.50%;消毒15 min，污染率14.70%、存活率45.11%、死亡率40.19%。综上结果，升汞消毒8 min，污染率高，达不到要求的灭菌效果;升汞消毒15 min时，能有效避免外植体的污染，但外植体的活性明显降低，死亡率较高，达40.19%;升汞消毒11 min，其污染率、死亡率适中，存活率达到55.33%，是最适合的升汞灭菌时间。
2.2 激素诱导培养
牡丹樱花的诱导培养共设计了12组对照，统计其诱导率，结果见表1。由表1可知，第8组培养基的诱导率最高，达到59.16%;第2、4组培养基的诱导率最低，为22.50%;其余各组差距不大。表明第8组培养基MS+1.5 mg/L BA+0.1 mg/L IBA 为最适培养基。
2.3 增殖培养
本次增殖培养是以MS为基本培养基，共计6组，统计结果见表2。经过初选，6组配比中，第1组的增殖系数最低，为1.31;第5组的增殖系数最高，为2.04。表明第5组配比MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA+30 g糖更适合台湾杜鹃樱花的继代培养。 2.4 生根培养
本次生根培养以1/2MS为基本培养基，不同激素配比，共6组，统计分析见表3。由表3可见，第4、5组的生根率为83.21%、72.10%，明显高于其他各组配比，且随着IBA浓度的增加，生根数反而减少。因此4组1/2MS+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA+15 g糖+1 g AC为台湾牡丹樱花的适合培养基。
2.5 驯化移栽
以生根的小苗经过驯化21 d，开瓶炼苗3 d后移栽，在3种不同配比的基质上移栽，分别于7 d、30 d统计存活率，结果见表4。通过统计存活率，前7 d，第2组、3组的成活率相差不大，30 d时第2组明显高于3组，表明采用基质泥炭土∶珍珠岩∶草木灰=5∶3∶2适宜台湾牡丹樱花的移栽。
3 结论
以台湾牡丹樱花当年新生枝条为材料，采集3月中旬至4月初生长健壮的枝条腋芽（侧芽）建立诱导、增殖、生根、出棚驯化的牡丹樱花快繁体系具有明显的市场意义。
试验结果表明：采集3月中旬至4月初的当年生枝条，其生长旺盛，木质化程度低，作为外植体最为适宜;外植体的最佳消毒时间为11 min，既能有效降低污染，又不影响腋芽（侧芽）的活性;在诱导过程中BA的增加，使诱导率有所提升，但超过1.5 mg/L时，诱导能力又有所下降。
在组织培养过程中，小苗的生长有多种影响因素。本试验着重于BA、IBA、NAA这3种激素对台湾牡丹樱花组培影响的研究，而对于其他激素及培养条件的影响未作关注。今后可以对加入更多的培养条件及激素深入探讨，以求获得更加适宜台湾牡丹樱花的组培条件。
参考文献：
[ 1 ] 郑慈真，何文杰，尹茜，等.樱花组培快繁体系的建立及组培苗移栽技术研究[J].乡村科技，2016（3）：6-10.
[ 2 ] 王红梅，李园莉.垂枝樱花组培技术研究[J].黑龙江農业科学，2016（9）：1-5.
[ 3 ] 李勇，方扬辉，郑雪燕，等.福建山樱花组培快繁技术[J].森林资源培育，2015（1）：20-23.
[ 4 ] 王慧娟，孟月娥，赵秀山，等.樱花组培苗的移栽技术研究[J].河南农业科学，2006（11）：99-101.
关键词：台湾牡丹樱花;快繁体系;建立;驯化技术
文章编号： 1005-2690（2020）10-0003-02 中图分类号： S685.99 文献标志码： B
牡丹樱花原产我国台湾省，又名台湾牡丹樱，花深红色、重瓣，花量大，盛花时红花满树、花团锦簇，是最具发展潜力的樱花新品种之一。牡丹樱花属蔷薇科落叶乔木，伞状树型，花先叶开放，花下垂，萼筒钟状;花瓣深红色，不完全开展，呈半开状;花朵授粉后，雌蕊留存，萼筒与花瓣自然脱落，花梗、萼筒均无毛，花期2月初至3月初;幼枝绿色，被短柔毛，不久脱落，老枝紫红色。
台湾牡丹樱花颜色鲜艳亮丽，是早春重要的观花树种，可用于观赏园林;也可种植于山坡、路边、建筑物前;还可以群植，造成“花海”景观，具有很好的园林观赏价值[1-4]。
1 材料与方法
1.1 材料选取
3月下旬至4月中旬，从沙淤园区采集生长健壮、无病虫害、花型优美的当年生半木质化台湾牡丹樱花枝条为试验外植体。
1.2 试验方法
以MS、1/2MS为基本培养基，调节培养基pH值为5.6，琼脂粉6.5 g/L，蔗糖1.5%～3%，配以植物激素BA、IBA、NAA，以及AC和基质土。
1.2.1 外植体获取
采摘前1 d用多菌灵消毒液喷洒枝条，于次日晴天中午采集消毒过的健壮新生枝条，于实验室待处理。用饱和洗衣粉液配以软毛刷洗刷干净枝条，用流水冲洗1 h。后剪切为1～2 cm带芽小段，放置于超净工作台中备用。
在超净工作台中用75%酒精浸泡1 min，无菌水冲洗3次，每次4 min。用0.1%升汞浸泡，以不同的消毒时间（8 min、11 min、15 min）处理外植体，用无菌水冲洗4次，每次4 min。
1.2.2 诱导培养
以MS为基本培养基，添加不同浓度的BA（0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.5 mg/L、2.0 mg/L）、IBA（0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.15 mg/L），共计12组，每组重复3次，每次40瓶，每瓶1个外植体。
1.2.3 继代培养
以诱导培养的芽体为原材料。以MS为基本培养基，添加不同浓度的BA（0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.5 mg/L）、NAA（0.05 mg/L、0.1 mg/L），共计6组，每组重复1次，每次40瓶，每瓶5个新芽。
1.2.4 生根培养
以继代培养的继代苗为原材料（2～3片叶、2～3 cm高）。以1/2MS为基本培养基，添加不同浓度的IBA（0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.5 mg/L）、NAA（0.5 mg/L、1.0 mg/L）、AC 1 g，共6组，每组重复1次，每次40瓶，每瓶5个继代苗。
1.2.5 室外移栽
选取生长健壮的生根苗，移出培养室，在室外驯化21 d，开瓶炼苗3 d，在不同配比的基质上移栽（泥炭土∶珍珠岩∶蛭石=5∶3∶2、泥炭土∶珍珠岩∶草木灰=5∶3∶2、泥炭土∶蛭石∶草木灰=5∶3∶2），共计3个处理，每个处理2 000株，分别于7 d、30 d统计存活率。
2 结果与分析
2.1 外植体获取
外植体升汞消毒分3组对照，分别计算污染率、存活率、死亡率。消毒8 min，污染率43.15%、存活率48.35%、死亡率8.50%;消毒11 min，污染率30.17%、存活率55.33%、死亡率14.50%;消毒15 min，污染率14.70%、存活率45.11%、死亡率40.19%。综上结果，升汞消毒8 min，污染率高，达不到要求的灭菌效果;升汞消毒15 min时，能有效避免外植体的污染，但外植体的活性明显降低，死亡率较高，达40.19%;升汞消毒11 min，其污染率、死亡率适中，存活率达到55.33%，是最适合的升汞灭菌时间。
2.2 激素诱导培养
牡丹樱花的诱导培养共设计了12组对照，统计其诱导率，结果见表1。由表1可知，第8组培养基的诱导率最高，达到59.16%;第2、4组培养基的诱导率最低，为22.50%;其余各组差距不大。表明第8组培养基MS+1.5 mg/L BA+0.1 mg/L IBA 为最适培养基。
2.3 增殖培养
本次增殖培养是以MS为基本培养基，共计6组，统计结果见表2。经过初选，6组配比中，第1组的增殖系数最低，为1.31;第5组的增殖系数最高，为2.04。表明第5组配比MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA+30 g糖更适合台湾杜鹃樱花的继代培养。 2.4 生根培养
本次生根培养以1/2MS为基本培养基，不同激素配比，共6组，统计分析见表3。由表3可见，第4、5组的生根率为83.21%、72.10%，明显高于其他各组配比，且随着IBA浓度的增加，生根数反而减少。因此4组1/2MS+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA+15 g糖+1 g AC为台湾牡丹樱花的适合培养基。
2.5 驯化移栽
以生根的小苗经过驯化21 d，开瓶炼苗3 d后移栽，在3种不同配比的基质上移栽，分别于7 d、30 d统计存活率，结果见表4。通过统计存活率，前7 d，第2组、3组的成活率相差不大，30 d时第2组明显高于3组，表明采用基质泥炭土∶珍珠岩∶草木灰=5∶3∶2适宜台湾牡丹樱花的移栽。
3 结论
以台湾牡丹樱花当年新生枝条为材料，采集3月中旬至4月初生长健壮的枝条腋芽（侧芽）建立诱导、增殖、生根、出棚驯化的牡丹樱花快繁体系具有明显的市场意义。
试验结果表明：采集3月中旬至4月初的当年生枝条，其生长旺盛，木质化程度低，作为外植体最为适宜;外植体的最佳消毒时间为11 min，既能有效降低污染，又不影响腋芽（侧芽）的活性;在诱导过程中BA的增加，使诱导率有所提升，但超过1.5 mg/L时，诱导能力又有所下降。
在组织培养过程中，小苗的生长有多种影响因素。本试验着重于BA、IBA、NAA这3种激素对台湾牡丹樱花组培影响的研究，而对于其他激素及培养条件的影响未作关注。今后可以对加入更多的培养条件及激素深入探讨，以求获得更加适宜台湾牡丹樱花的组培条件。
参考文献：
[ 1 ] 郑慈真，何文杰，尹茜，等.樱花组培快繁体系的建立及组培苗移栽技术研究[J].乡村科技，2016（3）：6-10.
[ 2 ] 王红梅，李园莉.垂枝樱花组培技术研究[J].黑龙江農业科学，2016（9）：1-5.
[ 3 ] 李勇，方扬辉，郑雪燕，等.福建山樱花组培快繁技术[J].森林资源培育，2015（1）：20-23.
[ 4 ] 王慧娟，孟月娥，赵秀山，等.樱花组培苗的移栽技术研究[J].河南农业科学，2006（11）：99-101.