补肾活血方干预兔膝骨性关节炎自噬和凋亡作用的研究

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摘要:目的 研究补肾活血方面的中药对兔膝骨性关节炎自噬和凋亡的影响和其治疗作用。方法 采用石膏绷带伸直位固定兔子左后肢膝关节,共6周,对20只兔子中16只兔子进行膝关节炎造模。分为正常对照组(4只)、模型组(6只)和模型+中药方组(10只)3组,正常对照组的兔子和模型对照组的兔子均用等量的生理盐水灌胃,模型+补肾活血方组的兔子用等量的中药(7.56mL/kg/d)灌胃,灌胃给药6w。取膝关节软骨组织进行HE 染色;采用 qPCR 检测各组膝关节软骨组织中细胞自噬相关基因 Beclin-1和凋亡相关基因 Bcl-2的表达;Western blot 检测膝关节软骨组织自噬蛋白 Beclin-1、抗凋亡蛋白 Bcl-2 表达。结果 正常对照组软骨表面光滑,软骨四层结构清晰,层次排列规则,软骨细胞数量正常,潮线清晰完整。模型组软骨表面不光滑,可见糜烂和缺损,深达辐射层,周围软骨见簇状增生明显,局灶骨赘,软骨层变薄显著,软骨厚薄不均匀,软骨细胞显著减少。加入补肾活血方处理后,软骨表面变光滑,簇状增生变少。模型组中细胞自噬相关基因Beclin-1表达显著增加,抗凋亡基因 Bcl-2表达显著降低,加入补肾活血方处理后,Beclin-1表达显著降低(P<0.05),Bcl-2表达显著增加(P<0.05)。模型组中细胞自噬蛋白Beclin-1表达显著增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达显著降低,加入补肾活血方处理后Bcl-2表达显著增加(P0.05)。结论 补肾活血方能显著降低自噬相关基因Beclin-1和自噬蛋白Beclin-1表达;能显著增加抗凋亡基因Bcl-2表达和增加抗凋亡蛋白Bcl-2表达,从而改善兔膝骨性关节炎。
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