【摘 要】
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目的用蛋白质组学方法分析去甲肾上腺素(NE)刺激人肺动脉阻力血管平滑肌细胞(PASMC)增殖前后细胞蛋白表达谱的变化。方法通过组织贴块法建立人PASMC细胞株；细胞经同步化后，用10
【机 构】
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南京医科大学附属常州第二人民医院呼吸科,南京医科大学第一附属医院呼吸科,南京医科大学第一附属医院胸心外科
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目的用蛋白质组学方法分析去甲肾上腺素(NE)刺激人肺动脉阻力血管平滑肌细胞(PASMC)增殖前后细胞蛋白表达谱的变化。方法通过组织贴块法建立人PASMC细胞株；细胞经同步化后，用10-5 mol/L NE处理细胞24h，对照组未作处理，采用双向凝胶电泳、质谱和生物信息学蛋白质组方法比较NE处理前后细胞蛋白表达谱的变化，并用质谱分析差异在5倍以上的蛋白质分子；进一步使用实时RT-PCR和Western blot法验证差异蛋白的表达变化。结果 原代培养的人PASMC细胞纯度＞99％;PASMC经NE刺激后，多种细胞蛋白表达发生改变，其功能涉及细胞骨架相关蛋白、代谢及信号转导等多方面；实时RT-PCR和Western blot结果显示，NE刺激后在细胞内转录和翻译水平，α-烯醇化酶基因表达上调，与二维电泳结果一致。结论NE刺激人PASMC后，可引起细胞内多种不同功能的蛋白表达发生改变，并部分通过α-烯醇化酶基因调控细胞生物学功能。
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