【摘 要】
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目的:探讨姜黄素调控LncRNA-UCA1/miR-582-5p通路抑制膀胱癌细胞增殖的机制.方法:以不同浓度的姜黄素干预人膀胱癌T24细胞,MTT法检测姜黄素对T24细胞的增殖抑制率,并绘制抑制率曲线图,筛选姜黄素最佳作用浓度及时间进行后续试验;双荧光素酶报告基因试验验证UCA1与miR-582-5p的靶向关系;RT-PCR法检测姜黄素对T24细胞中UCA1和miR-582-5p表达水平的影响;流式细胞术检测姜黄素对T24细胞周期以及凋亡的影响;划痕试验检测姜黄素对T24细胞迁移能力的影响;Tran-s
【机 构】
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陕西中医药大学基础医学院,咸阳 712046;陕西中医药大学医学科研实验中心,咸阳 712046
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目的:探讨姜黄素调控LncRNA-UCA1/miR-582-5p通路抑制膀胱癌细胞增殖的机制.方法:以不同浓度的姜黄素干预人膀胱癌T24细胞,MTT法检测姜黄素对T24细胞的增殖抑制率,并绘制抑制率曲线图,筛选姜黄素最佳作用浓度及时间进行后续试验;双荧光素酶报告基因试验验证UCA1与miR-582-5p的靶向关系;RT-PCR法检测姜黄素对T24细胞中UCA1和miR-582-5p表达水平的影响;流式细胞术检测姜黄素对T24细胞周期以及凋亡的影响;划痕试验检测姜黄素对T24细胞迁移能力的影响;Tran-swell侵袭试验检测姜黄素对T24细胞侵袭能力的影响.结果:姜黄素能够显著抑制人膀胱癌T24细胞增殖,并呈浓度时间依赖性,姜黄素0、5、10、20、30、40、50 μmol/L作用T24细胞后,增殖抑制率随浓度增高以及时间的延长显著增高(P＜0.01);UCA1上存在miR-582-5p的结合位点,进一步研究发现miR-582 mimic可显著降低UCA1野生型质粒荧光素酶活性(P＜0.01),而对UCA1突变型质粒荧光素酶活性无调控作用,表明UCA1上存在miR-582-5p的结合位点,两者可以直接相互作用,且呈负相关关系;姜黄素作用T24细胞24h后,UCA1表达水平随姜黄素浓度增高而下调,miR-582-5p表达上调(P＜0.05或P＜0.01);姜黄素10、20、40 μmol/L显著诱导T24细胞凋亡,抑制T24细胞迁移(P＜0.01),将细胞周期阻滞于S期(P＜0.01),明显降低侵袭细胞数(P＜0.05或者P＜0.01).结论:姜黄素能明显抑制人膀胱癌T24细胞增殖、迁移、侵袭、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡,表明姜黄素可能通过LncRNA-UCA1/miR-582-5p通路抑制人膀胱癌T24细胞增殖.
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