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目的构建天然抗菌多肽elafin基因高效表达载体——重组腺病毒载体,并探讨其在肺上皮细胞中的初步表达。方法提取人肺总RNA,进行elafin基因逆转录多聚酶链反应(RT—PCR)扩增,PCR产物双酶切后亚克隆至穿梭质粒pAdTrack—CMV上;在BJ5183细菌内和pAdEasy-1同源重组,筛选阳性克隆,酶切、PCR及测序鉴定,PacⅠ酶切线性化后脂质体法转染293细胞进行包装,获得腺病毒载体Ad—elafin;继之在293细胞内扩增,利用报告基因荧光蛋白(GFP)监测病毒滴度和感染效率;重组腺病毒A