【摘 要】
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目的 观察腺病毒介导的RNA干扰(RNAi)技术对人食管鳞癌细胞(Eca-109)环氧合酶(COX)-2基因表达的抑制效果及其对Eca-109细胞生长的影响.方法采用含RNA聚合酶Ⅲ启动子H1的质粒pSUPER构建针对人COX-2 mRNA的重组质粒psiRNA/COX-2.Not Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切psiRNA/COX-2得到siRNA/COX-2表达片段,定向克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTra
【机 构】
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250012,济南,山东大学齐鲁医院胸外科,250012,济南,山东大学齐鲁医院消化内科
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目的 观察腺病毒介导的RNA干扰(RNAi)技术对人食管鳞癌细胞(Eca-109)环氧合酶(COX)-2基因表达的抑制效果及其对Eca-109细胞生长的影响.方法采用含RNA聚合酶Ⅲ启动子H1的质粒pSUPER构建针对人COX-2 mRNA的重组质粒psiRNA/COX-2.Not Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切psiRNA/COX-2得到siRNA/COX-2表达片段,定向克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack的相同位点得到pAdTrack/siRNA/COX-2,后者与骨架质粒pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183中同源重组得到腺病毒Ad/siRNA/COX-2,经293细胞包装、扩增后转染Eca-109细胞.ELISA法测定培养液上清的前列腺素(PG)E2浓度,PCR法检测细胞COX-2 mRNA水平,流式细胞仪检测细胞凋亡与周期分布,绘制细胞生长曲线.结果重组腺病毒Ad/siRNA/COX-2构建成功,转染Eca-109细胞后,细胞COX-2 mRNA水平下降71.7%(P＜0.01),培养液上清PGE2浓度下降62.0%(P＜0.01);细胞生长明显减缓,G0-G1期细胞比例增加、S期与G2-M期细胞比例减少(P＜0.01),细胞凋亡增多(P＜0.01).结论腺病毒介导的RNAi技术可显著抑制人食管鳞癌细胞COX-2基因表达,从而导致肿瘤细胞增殖减缓、凋亡增加。
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经颈内静脉肝内门体分流术(TIPS)已被成功地用于治疗门静脉高压症伴食管静脉曲张破裂大出血和腹水.TIPS与断流术的联合应用能显著减少食管静脉曲张再出血率,提高门静脉高压症患者的生存率[1].本研究进一步总结TIPS加断流术联合治疗的随访结果,深入探讨这一治疗模式的临床价值。
<正> 由上海第二医科大学附属仁济医院,上海市消化疾病研究所主办的2005年《消化系统疾病进展》学习班(国家继续教育项目,编号:2005-03-03-042,Ⅰ类学分12分)将于2005年11月中旬举办,时间为7天。学习班由中华医学会消化病学分会名誉主任委员萧树东教授等消化学科有较深造诣的知名专家授课,内容新颖,结合临床,欢迎消化内外科、肿瘤科、病理科及其他相
Toll样受体（toll—like receptors，TLR）是1997年发现的天然免疫系统中的细胞跨膜受体，可与病原识别模式分子结合，在MD-2、CD14辅助下激活下游信号传导分子，最终导致核因子（NF）-kB激活，引发炎症介质表达，成为联系天然免疫与获得性免疫的纽带。本研究检测活动期溃疡性结肠炎（UC）肠黏膜TLR4、CD14与NF—kB的表达并将其与疾病活动度及病理分级相比较，以探讨它们在
编者按:2005年12月,中华消化病学分会在重庆召开了全国首届Barrett食管(BE)学术研讨会,经充分讨论,对其中能统一的意见达成共识,刊登于下.文中对BE的定义作了修改,不规定柱状上皮要有肠化生才能作出BE的诊断,在分型中对短节段BE、长节段BE,今后统一命名为短段BE与长段BE,共识意见对有关BE的随访、治疗等提出了指导性意见.希望读者能对此提出宝贵意见,以便今后不断修订。
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