【摘 要】
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探究PEDV ORF3蛋白对I型干扰素及其信号分子转录水平的影响。构建PEDV ORF3蛋白真核表达载体pcDNA3.0-FlagORF3,将重组载体以时间梯度和剂量梯度转染至293T细胞。通过RT-PCR
【机 构】
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黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院;
【基金项目】
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黑龙江八一农垦大学研究生创新科研项目(YJSCX2017-Y60、YJSCX2017-Y66);黑龙江八一农垦大学校内培育课题重点项目(XA2017-02);国家自然基金青年基金(31200121/C010802)
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探究PEDV ORF3蛋白对I型干扰素及其信号分子转录水平的影响。构建PEDV ORF3蛋白真核表达载体pcDNA3.0-FlagORF3,将重组载体以时间梯度和剂量梯度转染至293T细胞。通过RT-PCR检测ORF3对IFN-β、ISG54、ISG56转录水平的影响。结果显示,随着重组载体转染剂量的增加,IFN-βmRNA转录水平逐渐降低;将重组载体以时间梯度转染后,IFN-βmRNA转录水平在转染24 h后开始降低,ISG54、ISG56 mRNA转录水平在转染12 h后开始降低;并且PEDV ORF3蛋白明显抑制poly(I:C)诱导的IFN-βmRNA转录。以上结果表明PEDV ORF3蛋白可抑制IFN-β、ISG54、ISG56 mRNA转录,具有拮抗I型干扰素应答的功能。
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