Th17细胞因子在CD大鼠结肠不同炎性时期的差异表达

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目的:观察不同次数三硝基苯磺酸(trinitrobenzene-sulfonic acid,TNBS)灌肠刺激对大鼠肠道炎症程度及结肠组织Th17细胞因子白介素(interleukin,IL)-6、IL-17A、IL-21、维甲酸相关孤核受体γt(retinoid-related orphan nuclear receptorγt,RORγt)表达的影响.方法:30只清洁级♂SD大鼠,160 g±10 g,随机分为正常对照组(NG)、1 wk造模组、2 wk造模组、3 wk造模组、4 wk造模组.按照Morris等方法制备克罗恩病(Crohn’s disease,C D)大鼠模型,T N B S灌肠液由5%T N B S与500 m L/L的乙醇按2∶1比例混合而成,1次/wk.采用结肠一般形态和HE病理观察TNBS对结肠黏膜的病理损伤程度,荧光定量P C R、免疫组织化学等技术观察各组大鼠结肠黏膜中RORγt、IL-17A的表达,ELISA法观察血清中IL-6、IL-21含量的变化.结果:大鼠结肠IL-17A m RNA水平在第1次TNBS诱导后表达为下降,在3 wk时,IL-17A m RNA与蛋白水平明显升高(P<0.05),第4次诱导后达到最高.大鼠结肠RORγt蛋白随着刺激次数的增加而表达量逐渐增高(P<0.05),第4次诱导后达到最高(P<0.05);血清中I L-6、I L-21含量也均在1 w k时间点即开始显著上升(P<0.01),在第4周达到最高值.模型大鼠结肠组织大体形态评分和组织损伤评分显著增加(P<0.01).结论:TNBS诱导CD模型过程中,Th17细胞因子IL-6、IL-17A、IL-21、RORγt的含量随着刺激次数的增加而逐渐增加,并伴随结肠炎症程度的加重而逐渐加重.
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