【摘 要】
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TA克隆技术广泛用于PCR产物的克隆,它是利用Taq酶能够在PCR产物的3’末端加上一个非模板依赖的A,而T载体是一种带有3’T突出端的载体,连接反应可以快速地、一步到位地把PCR产
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TA克隆技术广泛用于PCR产物的克隆,它是利用Taq酶能够在PCR产物的3’末端加上一个非模板依赖的A,而T载体是一种带有3’T突出端的载体,连接反应可以快速地、一步到位地把PCR产物直接插入到质粒载体的多克隆位点(MSC)。本实验以p PICQKh BMP4为模板,利用PCR技术对h BMP4基因(人骨形态发生蛋白-4)进行扩增,柱层析法进行纯化,纯化产物与PMD18-T载体进行连接,在预冷的感受态细胞中进行转化,最后在X-gal、IPTG、Amp的L-琼脂平板培养基上培养形成单菌落,完成筛选,得到转化成功的重组质粒。结果表明TA克隆技术是一种快捷而可靠的克隆,对于DNA重组具有重要的作用。
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