【摘 要】
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采用ＰＣＲ扩增技术，制备了Ｄｉｇ标记志贺氏菌多拷贝的ｉｐａＨ基因探针。用该探针通过菌落斑点杂交试验，探索快速、特异、敏感、简单检测志贺氏菌的方法。本法检测灵敏度达５－１０ｐｇＤＶＡ／μｌ。含菌量为３×１０６ＣＦＵ／ｍｌ的粪便上
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采用ＰＣＲ扩增技术，制备了Ｄｉｇ标记志贺氏菌多拷贝的ｉｐａＨ基因探针。用该探针通过菌落斑点杂交试验，探索快速、特异、敏感、简单检测志贺氏菌的方法。本法检测灵敏度达５－１０ｐｇＤＶＡ／μｌ。含菌量为３×１０６ＣＦＵ／ｍｌ的粪便上清液直接抽滤点膜２５μｌ杂交结果为阳性。与经ＰＣＲ扩增测定的５０株细菌（其中ｉｐｔａＨ基因阳性菌２５株，阴性菌２５株）进行比较，菌落斑点杂文结果与ＰＣＲ扩增结果完全一致。全部实验可在２０ｈ内完成。
Multi-copy probe of ipaH gene of Dig-tagged Shigella was prepared by PCR amplification. Through the colony spot hybridization test with this probe, a rapid, specific, sensitive and simple method for detecting Shigella was explored. Detection sensitivity of this method up to 5-10pgDVA / μl. Strain of 3 × 106CFU / ml of supernatant of the feces was directly blotted membrane 25μl hybridization results were positive. Compared with 50 strains of bacteria (including 25 strains of iptaH positive bacteria and 25 strains of negative bacteria) amplified by PCR amplification, the results of colony dot scribe were completely consistent with those of PCR amplification. All experiments can be completed within 20h.
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