【摘 要】
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目的探讨益母草碱对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响。方法将HUVECs分为正常糖组、高糖组、益母草碱+高糖组、LY294002(磷脂酰肌醇3激酶抑制剂)+益母草碱+高糖组和L-NAME[内皮源性一氧化氮合酶(eNOS)抑制剂]+益母草碱+高糖组,采用噻唑蓝法检测内皮细胞活力,Hoechst染色检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测细胞中磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(p-Akt)、磷酸化
【机 构】
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200120 上海,同济大学附属东方医院心内科,200092 上海交通大学医学院附属新华医院药学部,200092 上海交通大学医学院附属新华医院核医学科,200092 上海交通大学医学院附属新华医院老
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目的探讨益母草碱对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响。
方法将HUVECs分为正常糖组、高糖组、益母草碱+高糖组、LY294002(磷脂酰肌醇3激酶抑制剂)+益母草碱+高糖组和L-NAME[内皮源性一氧化氮合酶(eNOS)抑制剂]+益母草碱+高糖组,采用噻唑蓝法检测内皮细胞活力,Hoechst染色检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测细胞中磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(p-Akt)、磷酸化eNOS(p-eNOS)的蛋白表达水平,一氧化氮检测试剂盒检测细胞培养基中一氧化氮水平。
结果与正常糖组比较,高糖组细胞活力明显降低[(55±13)%比(100±0)%]、细胞凋亡指数明显增加[(20.6±4.0)%比(4.7±1.5)%]、p-Akt(0.50±0.11比1.00±0.00)和p-eNOS(0.50±0.10比1.00±0.00)的蛋白表达水平明显降低、一氧化氮的合成水平明显降低[(17.7±6.8)%比(52.7±9.3)%](均P<0.05);与高糖组比较,益母草碱+高糖组细胞活力[(92±6)%]明显增加、细胞凋亡指数[(5.7±2.1)%]明显降低、p-Akt及p-eNOS的表达水平明显增加(0.88±0.10、0.90±0.09),一氧化氮的合成水平[(49.3±7.0)%]明显增加(均P<0.05);与益母草碱+高糖组比较,LY294002+益母草碱+高糖组和L-NAME+益母草碱+高糖组细胞活力[(66±13)%、(69±10)%]均明显降低,细胞凋亡指数[(17.7±3.5)%、(18.7±4.5)%]均明显增加,p-Akt和p-eNOS的蛋白表达水平均明显降低,一氧化氮的合成水平[(20.3±8.0)%、(19.7±5.0)%]明显降低(均P<0.05)。
结论益母草碱通过磷脂酰肌醇3激酶-丝氨酸/苏氨酸激酶-eNOS信号通路抑制高糖诱导的内皮细胞凋亡。
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