探讨熊果酸(UA)在肾脏缺血再灌注损伤(IRI)中的作用及其机制。
方法30只C57BL/6J小鼠(购自南京大学模式动物研究所)随机分为3组，假手术组(Sham组)、肾脏缺血再灌注损伤组(IRI组)和UA预处理组(UA＋IRI组)。采用右肾切除左肾蒂钳夹30 min方式构建小鼠肾脏IRI模型，检测各组血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)变化，并利用糖原染色(PAS)观察肾脏组织形态学改变。同时检测各组肾脏组织内丙二醛(MDA)、羰基化蛋白(CP)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性，利用蛋白印迹法(Western blot)检测肾脏组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)和醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白表达水平。此外，应用HK-2细胞缺氧/复氧模型(H/R)进一步从细胞水平评估UA在IRI中的作用。两样本均数间比较采用t检验，多样本均数间比较采用单因素方差分析。
结果相较于I/R组，UA＋I/R组血清SCr[(0.61±0.09) mg/dl比(1.62±0.21) mg/dl]和BUN[(61.53±8.46) mg/dl比(135.38±15.61) mg/dl]值显著降低，肾小管损伤(1.55±0.14比3.52±0.23)明显减轻(t＝7.316，P<0.05)。此外，UA预处理可降低小鼠肾脏内MDA[(4.13±0.71) nmol/mg比(7.65±0.89) nmol/mg]和CP含量[(2.92±0.33) nmol/mg比(5.36±0.48) nmol/mg]，增加SOD[(45.48±4.16) U/mg比(22.15±3.36) U/mg]和CAT活性[(38.66±4.52) U/mg比(21.54±3.85) U/mg]。Western blot结果提示UA＋IRI组Nrf2、HO-1和NQO1表达水平较IRI组明显上升。此外，UA预处理显著降低了H/R导致的细胞死亡增加和MDA含量上升[(1.14±0.12) nmol/ml比(2.15±0.15) nmol/ml]，同时增加了细胞SOD活性[(25.86±1.85) U/ml比(13.74±1.46) U/ml，t＝5.413，P<0.05]，但在Nrf2稳定敲低表达的HK-2细胞中，UA并不能明显降低MAD含量和增加SOD活性。
结论UA可以诱导Nrf2和下游基因HO-1和NQO-1的表达，提高机体抗氧化应激能力，从而保护肾脏IRI。