建立小鼠腹水中JWA单克隆抗体(Monoclonalantibody,mAb)的制备方法及鉴定,获得高纯度、高效价的JWA单克隆抗体。对预先用弗氏不完全佐剂处理的小鼠腹腔接种JWA单克隆抗体杂交瘤细胞,收集小鼠腹水、离心,采用Protien G亲和柱层析法进行亲和层析纯化JWA单克隆抗体,并采用SDS-PAGE检测方法分析纯化抗体的纯度。分别运用细胞免疫荧光、免疫印迹技术鉴定纯化的抗体特异性。BCA法测定纯化后JWA单抗的浓度为6.79 mg/mL;SDS-PAGE电泳显示纯化的抗体只有IgG的重链和轻链,而没有其它杂蛋白带;纯化后的JWA单抗在免疫荧光实验可以检测到细胞中JWA蛋白在胞浆中呈丝状均匀分布,与前期实验结果一致。免疫印迹实验中1∶800、1∶400均可以得到清晰的目的条带。用Protein G亲和层析法获得了高纯度和较高效价的JWA单克隆抗体,这将为JWA蛋白的基础和应用研究提供技术支持。