小干扰RNA沉默半乳糖凝集素3基因表达对胆管癌细胞增殖凋亡的影响及机制

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目的

抑制半乳糖凝集素3(Galectin-3)基因表达对胆管癌细胞增殖凋亡的影响及机制。

方法

反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测胆管癌组织中Galectin-3基因的mRNA及蛋白表达;si-Galectin-3转染HCCC-9801细胞,同时转染阴性对照组和正常对照组,转染48 h后Western blot检测Galectin-3、细胞核增殖抗原(Ki-67)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白表达;细胞计数试剂盒(CCK-8)实验和流式细胞仪分别检测细胞增殖及凋亡。

结果

胆管癌组织中Galectin-3基因的mRNA(5.558±0.056)及蛋白表达(0.269±0.025)显著高于癌旁组织(0.977±0.031、0.037±0.011)(tmRNA=8.626,PmRNA=0.003;t蛋白表达=8.997,P蛋白表达=0.002);si-Galectin-3组Galectin-3(0.094±0.012)、Ki-67(0.201±0.025)、β-catenin(0.261±0.024)、Cyclin D1(0.137±0.017)蛋白表达及细胞存活率[(95.26±3.42)%]均显著低于Normal组[(0.358±0.031)%、(0.426±0.032)%、(0.894±0.047)%、(0.435±0.031)%、(71.12±4.48)%](tGalectin-3=9.007,PGalectin-3=0.002;tKi-67=8.138,PKi-67=0.003;tβ-catenin=9.345,Pβ-catenin=0.002;tCyclin D1=9.977,PCyclin D1=0.001;t细胞存活率=8.452,P细胞存活率=0.003);细胞凋亡率[(17.12±1.28)%]及Cleaved Caspase-3(0.121±0.015)表达均显著高于对照组[(1.54±0.47)%、0.031±0.011](t细胞凋亡率=10.002,P细胞凋亡率=0.001;tCleaved Caspase-3=9.879,PCleaved Caspase-3=0.001)。

结论

下调Galectin-3基因表达可通过抑制Wnt/β-catenin信号通路降低HCCC-9801细胞增殖及诱导细胞的凋亡。

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