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利用逆转录病毒载体LXSN构建了含有完整编码TNFeDNA的重组逆转录病毒质粒pLXSN-tnf.用Lipofectamine将重组质粒导入病毒包装细胞pA317.经G418筛选培养获得抗性克隆.用NIH3T3细胞测定病毒滴度,获得滴度为5×10^6CFU/ml的细胞克隆。利用病毒上清液感染大鼠做质瘤细胞系C6,得到G418抗性克隆细胞C6pLXSN-tnf,经PCR检测,TNFeDNA完整地整合在细胞基因组中.测定C6pLXSN-tnf细胞上清中TNF的生物活性,结果显录TNF有相对稳定的表达