【摘 要】
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目的 探讨miR-590-3p通过调控Dicer1对鼻咽癌细胞侵袭转移的影响及其作用机制.方法 收集2017年8月-2019年2月于我院经手术切除且被证实为鼻咽癌的组织标本以及对应的癌旁组织标本各40例,RTFQ-PCR检测miR-590-3p在鼻咽癌组织及癌旁组织、人鼻黏膜上皮细胞(HNEpC)、鼻咽癌细胞株CNE-1、CNE-1-mimics-miR-590-3p及阴性对照CNE-1-mimics-NC中的表达情况.Western blot检测Dicer1在各细胞株中的表达.生物信息学预测及双荧光素酶
【机 构】
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河北省胸科医院耳鼻喉科,河北石家庄050048;开滦总医院耳鼻喉科,河北唐山063000
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目的 探讨miR-590-3p通过调控Dicer1对鼻咽癌细胞侵袭转移的影响及其作用机制.方法 收集2017年8月-2019年2月于我院经手术切除且被证实为鼻咽癌的组织标本以及对应的癌旁组织标本各40例,RTFQ-PCR检测miR-590-3p在鼻咽癌组织及癌旁组织、人鼻黏膜上皮细胞(HNEpC)、鼻咽癌细胞株CNE-1、CNE-1-mimics-miR-590-3p及阴性对照CNE-1-mimics-NC中的表达情况.Western blot检测Dicer1在各细胞株中的表达.生物信息学预测及双荧光素酶报告基因实验验证miR-590-3p和Dicer1的靶向关系.Transwell检测miR-590-3p对鼻咽癌细胞侵袭能力的影响;划痕实验检测miR-590-3p对鼻咽癌细胞迁移能力的影响.IFA检测miR-590-3p对上皮间质转化(EMT)相关分子N-cadherin表达的影响.结果 miR-590-3p在鼻咽癌组织和鼻咽癌细胞株CNE-1中的表达水平分别低于癌旁组织和正常人鼻黏膜上皮细胞;与CNE-1及CNE-1-mimics-NC相比,稳定过表达细胞系CNE-1-mimics-miR-590-3p中miR-590-3p、Dicer1的表达水平均显著升高(P＜0.05).经Target Scan数据库分析发现miR-590-3p和Dicer1有互补结合位点,双荧光素酶报告基因实验证实两者能靶向结合.过表达miR-590-3p能显著降低鼻咽癌细胞的侵袭及转移能力,同时抑制N-cadherin的表达水平.结论 miR-590-3p在鼻咽癌中通过靶向上调Dicer1的表达,广泛促进miRNA的成熟,降低N-cadherin的表达,进而抑制鼻咽癌细胞的EMT进程以及侵袭转移能力.
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