目的:建立HPLC法测定板蓝根药材中10种游离氨基酸和结合氨基酸含量的方法。方法:采用2,4-二硝基氟苯柱前衍生法及微波水解-柱前衍生法测定板蓝根药材中10种游离氨基酸和水解氨基酸的含量,再通过水解氨基酸与游离氨基酸的差值计算出结合氨基酸的含量。色谱柱为Inertsil ODS-3柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相A为0.03 mol·L-1乙酸钠缓冲液(pH 6.4,含0.15%三乙胺),流动相B为乙腈,梯度洗脱;检测波长为360 nm;柱温为27℃;流速为0.6 mL·min-1。结果:板蓝根药材中天门冬氨酸等10种游离氨基酸和水解氨基酸在一定范围内,浓度与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率在85%～115%范围内,RSD均在3%以内。板蓝根药材中游离氨基酸以精氨酸和脯氨酸含量最高,分别大于20和10mg·g-1;水解氨基酸以精氨酸、脯氨酸、谷氨酸、组氨酸含量为高,分别大于36,11,7和7 mg·g-1;结合氨基酸则以精氨酸、谷氨酸、组氨酸、天冬氨酸含量为高,分别大于17,6,4.5和4.5 mg·g-1。结论:本方法适合用于板蓝根药材中天门冬氨酸等10种氨基酸的游离氨基酸和结合氨基酸的含量测定,方法简便、快速、准确,可用于板蓝根的氨基酸质量控制。