目的:检测经典BCR/ABL1阴性慢性骨髓增殖性疾病患者JAK2、CALR、MPL基因突变,探讨其诊断价值。方法:2012年3月至2015年12月208例BCR/ABL1阴性慢性骨髓增殖性疾病患者（ET146例,PV37例,MF25例）纳入BCR/ABL1阴性CMPN组,124例继发性血小板增多及73例继发性红细胞增多症患者纳入对照组。抽取骨髓或静脉血提取基因组DNA及总RNA,进行JAK2基因外显子12至20,MPL基因外显子10以及CALR基因外显子3至9测序分析。结果:146例ET患者中,JAK2V617F突变86例（58.9%）;JAK2 exon 12突变2例（1.4%）;CALR突变41例（28.1%）,其中Ⅰ型（c.1092₁143del）22例,Ⅱ型（c.1154₁155insTTGTC）11例,Ⅴ型（c.1091₁142del）1例,Ⅷ型（c.1104₁137del）1例,41型（c.1107₁137del）1例,42型（c.1125₁125del）1例,其他（c.1107₁115del,c.1111₁144 del,c.1101 A>C,c.1112₁117del）4例;MPL基因突变9例（6.2%）。JAK2、CALR、MPL基因突变均阴性的患者有8例（5.4%）。37例PV中检出JAK2以及CALR突变共35例（94.6%）,其中JAK2V617F突变31例（83.8%）,JAK2 exon 12突变2例（5.4%）;CALR突变2例（5.4%）,其中Ⅰ型1例,另1例为CALR c.1191₁193del。JAK2、CALR、MPL突变均阴性2例。25例MF中检出JAK2V617F突变19例（76%）,CALR突变2例（8%）;JAK2、CALR、MPL突变均阴性的患者有4例（16%）。124例继发性血小板增多的患者以及73例继发性红细胞增多的患者中,均未检测出JAK2、CALR或者MPL基因突变。结论:联合JAK2、CALR、MPL基因突变能覆盖大多数BCR/ABL1阴性的骨髓增殖性疾病患者,CALR突变在ET患者中检出率较高,因此CALR突变可作为JAK2、MPL突变阴性的ET的新诊断指标。