【摘 要】
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目的:利用毕赤酵母人抗狂犬病毒抗体分泌表达文库获得具特异性狂犬病毒抗原结合活性的分泌型小分子抗体(scFv—Fc)。方法:RTPCR方法扩增获得一组轻链和重链可变区基因。利用重叠
【机 构】
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吉林大学再生医学科学研究所生物化学研究室,广东药学院生命科学与生物制药学院生物技术教研室,吉林大学第二医院妇产科,吉林省疾病预防控制中心
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)资助课题(2004AA205020)
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目的:利用毕赤酵母人抗狂犬病毒抗体分泌表达文库获得具特异性狂犬病毒抗原结合活性的分泌型小分子抗体(scFv—Fc)。方法:RTPCR方法扩增获得一组轻链和重链可变区基因。利用重叠延伸PCR方法组装scFv基因后克隆人毕赤酵母scFv-Fc抗体库通用表达质粒pPICZα/Fc后,电转化X33酵母菌,甲醇诱导表达后进行EIJISA筛选、基因序列分析及免疫印迹分析。结果:构建了抗狂犬病毒毕赤酵母分泌型scFv—Fc库,获得了12株阳性菌株。对其中2株阳性克隆进行了序列分析证实为新的抗体可变区基因。ELISA、W
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