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目的
观察4-苯基丁酸(4-PBA)抑制内质网应激对大鼠皮瓣缺血再灌注损伤的影响。
方法选择Wistar大鼠75只,建立大鼠腹部皮瓣缺血再灌注损伤模型,随机分为对照组、4-PBA组、生理盐水组(NC组)。对照组大鼠皮瓣形成后及4-PBA组、NC组皮瓣缺血再灌注后0、1、6、12、24 h,分别于皮瓣边缘取全厚皮瓣组织,行病理形态学观察;应用原位末端脱氧核苷转移酶标记法(TUNEL)检测皮瓣组织细胞凋亡情况;RT-PCR法检测GRP78、CHOP mRNA表达水平;Western-blot及免疫荧光染色法分析GRP78、CHOP蛋白表达水平,并行相关性分析。
结果组织学观察发现NC组在缺血再灌注损伤6 h后组织肿胀程度、坏死细胞和炎性细胞数较4-PBA组明显增加。缺血再灌注损伤6和24 h,4-PBA组与NC组相比TUNEL阳性细胞数分别减少19.4%和26.1%,差异有统计学意义(P<0.05)。缺血再灌注损伤6、12、24 h,4-PBA组较NC组CHOP、GRP78 mRNA表达水平及蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论4-PBA通过抑制内质网应激介导的细胞凋亡机制,能减轻大鼠皮瓣缺血再灌注损伤后细胞凋亡,起到对皮瓣缺血再灌注后的保护作用。