人β细胞素基因原核表达载体的构建

来源 :中国现代医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wbgbg

【摘要】

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目的构建人BTC基因的原核表达载体。方法以人胰岛细胞瘤CDNA为模板，采用聚合酶链式反应（PCK）扩增BTC基因成熟蛋白编码区的全部序列，克隆入原核细胞表达载体PET32a（＋）中，经限制性内切

【作者】

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陈寒蓓董艳苏青

【机构】

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上海交通大学附属新华医院内分泌科

【出处】

：

中国现代医学杂志

【发表日期】

：

2007年2期

【关键词】

：

BTC 基因克隆原核表达载体 BTC gene clone prokatyofic expression vector

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目的构建人BTC基因的原核表达载体。方法以人胰岛细胞瘤CDNA为模板，采用聚合酶链式反应（PCK）扩增BTC基因成熟蛋白编码区的全部序列，克隆入原核细胞表达载体PET32a（＋）中，经限制性内切酶双酶切及DNA序列分析鉴定目的基因。结果PCK扩增的特异性片段长度为240bp，以此构建的重组质粒PET32a（＋）-BTC，经KpnⅠ和XhoⅠ双酶切后显示5．9kb和250bp左右的两条片段，测序结果与Genbank中的人BTC基因eDNA（Genbank序列号NM_001729）序列一致。证明人BTC基因已

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