转染重组人骨形态发生蛋白-7基因对骨髓基质细胞生物学行为的影响

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zywlaoying
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目的观察重组人骨形态发生蛋白-7(rhBMP-7)基因转染骨髓基质细胞(BMSCs)后的稳定表达及表达产物对BMSCs生物学行为的影响.方法利用脂质体介导法将rhBMP-7基因转染BMSCs,以G418筛选出阳性克隆并扩大培养,用免疫组织化学链霉抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)法检测转基因细胞的稳定表达;转染48 h后,用转基因细胞的培养液上清刺激正常培养的BMSCs,利用3H标记的胞腺嘧啶氧核苷(3H-TdR)掺入法、Na235SO4掺入法以及氯胺T法检测基因表达产物对BMSCs增殖、合成蛋白多糖以及胶原的影响.结果转基因细胞4周时仍能表达外源性基因;基因表达产物能明显促进BMSCs的增殖以及蛋白多糖和胶原的合成.结论 rhBMP-7基因转染BMSCs后可获得稳定表达,且基因表达产物能促进BMSCs增殖,诱导其向软骨细胞分化并增强其生物学活性.

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