【摘 要】
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目的:探讨肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(TIPE2)对脂多糖(LPS)活化的巨噬细胞凋亡的影响及作用机制.方法:采用LPS(1.0 mg/L)处理RAW264.7细胞24 h,RT-qPCR检测IL-6、TNF-α、TIPE2 mRNA表达,Western blot检测TIPE2蛋白表达.采用LPS处理稳定过表达或敲降TIPE2细胞系24 h,CCK-8检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率,Tunel染色检测细胞凋亡指数,Western blot检测凋亡相关蛋白cleaved
【机 构】
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湖南师范大学小分子靶向药物研究与创制实验室,长沙410013
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目的:探讨肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(TIPE2)对脂多糖(LPS)活化的巨噬细胞凋亡的影响及作用机制.方法:采用LPS(1.0 mg/L)处理RAW264.7细胞24 h,RT-qPCR检测IL-6、TNF-α、TIPE2 mRNA表达,Western blot检测TIPE2蛋白表达.采用LPS处理稳定过表达或敲降TIPE2细胞系24 h,CCK-8检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率,Tunel染色检测细胞凋亡指数,Western blot检测凋亡相关蛋白cleaved Caspase-8、Bcl-2、Bax、CHOP、cleaved Caspase-3及Akt、p-AktSer473蛋白表达.采用类胰岛素生长因子(IGF-1,100μg/L)预孵育过表达TIPE2细胞系2 h,LPS共处理24 h,CCK-8检测细胞活力,Western blot检测凋亡相关蛋白表达.结果:LPS可活化巨噬细胞,上调IL-6、TNF-αmRNA表达,下调TIPE2 mRNA和蛋白表达(P<0.05).过表达TIPE2明显降低活化巨噬细胞活力,升高凋亡率和凋亡指数,促进cleaved Caspase-8、Bax、CHOP、cleaved Caspase-3蛋白表达,抑制Bcl-2、p-AktSer473蛋白表达(P<0.05);敲降TIPE2作用与之相反.此外,Akt磷酸化激动剂IGF-1可有效减弱TIPE2对活化巨噬细胞活力及凋亡相关蛋白的作用(P<0.05).结论:TIPE2可能通过抑制Akt磷酸化,进而激活死亡受体途径、线粒体途径和内质网应激途径,促进LPS活化的巨噬细胞凋亡.
其他文献
目的:系统评价中药熏洗对前交叉韧带重建术后康复的影响.方法:计算机检索PubMed、EMbase、The Cochrane Library、Web of Science、CNKI、CBM、WanFang和维普数据库,搜集对前交叉韧带重建术后康复影响的随机对照试验(RCT),检索时限均从建库至2020年11月30日.2名研究者独立进行文献筛选、资料提取、偏倚风险评价后,采用RevMan 5.3软件进行系统评价.结果:共纳入研究6项,Meta分析结果显示,前交叉韧带重建术后采用中药熏洗,能提高术后3月的Lys
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汗由阳气蒸化津液出于体表而成,汗出异常时常单独出现或作为某些疾病的伴随症状.牛云飞主任医师对汗出异常的诊疗有独到见解,强调调心为治汗之本.治疗上常采用益气补血、滋阴敛汗、温振心阳、化瘀通络等四法治之.临床行之覆杯而愈,患者赞誉有加.
目的:分析中医专硕研究生科研创新能力不足的原因,提高其创新能力.方法:首先从三方面夯实理论基础,推陈出新:一是规培单位优化培训结构,理论与实践相结合;二是导师组织专科学习,引导学生深入专科领域;三是学生积极交流主动学习,善于总结与思考.其次要重视实验研究,从实验走向临床.再者需要个性化培养,激发新思路.最后要多学科互动合作,交叉学习.结果:中医专硕研究生科研创新能力不足,与学校、规培单位、导师及学生本人都有相应的关系.结论:结合以上方法,中医专硕研究生的科研创新能力将有新的发展空间.
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