【摘 要】
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目的 通过观察树突状细胞(dendritic cells,DCs)Notch信号通路对CD4+T细胞分化的影响,探究六味地黄汤干预实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyeli-tis,EAE)的机制.方法 采用主动免疫法诱导2D2小鼠EAE模型,采用磁珠分选收集脾脏和淋巴结中CD4+T细胞;体外分离培养及诱导C57BL/6(C57)小鼠骨髓来源树突状细胞(bone mar-row derived dendritic cells,BMDCs)成熟,分
【机 构】
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南方医科大学中医药学院,广东 广州 510515;南方医科大学第一临床医学院,广东 广州 510515;南方医科大学南方医院,广东 广州 510515
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目的 通过观察树突状细胞(dendritic cells,DCs)Notch信号通路对CD4+T细胞分化的影响,探究六味地黄汤干预实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyeli-tis,EAE)的机制.方法 采用主动免疫法诱导2D2小鼠EAE模型,采用磁珠分选收集脾脏和淋巴结中CD4+T细胞;体外分离培养及诱导C57BL/6(C57)小鼠骨髓来源树突状细胞(bone mar-row derived dendritic cells,BMDCs)成熟,分组干预后,与CD4+T细胞共培养后,被动注射至C57小鼠体内,观察小鼠发病情况.将BMDCs与CD4+T细胞的共培养细胞分为对照组、六味地黄汤组、γ分泌酶抑制剂(gamma-secretase inhibitor,GSI)组.采用Western blot法检测各组BM-DCs的Notch通路蛋白表达水平,采用流式细胞仪分析各组CD4+T细胞分化情况.结果 与正常组比较,模型组Notch通路相关蛋白Notch1、Jagged1、MAML蛋白表达水平均显著升高(P<0.05).与模型组比较,六味地黄汤组DCs的Notch1、Jagged1、MAML蛋白水平显著下调(P<0.05).通过BMDCs诱导的CD4+T细胞向Treg分化增多,向Th17分化减少,并改善被动免疫诱导的EAE小鼠症状评分.结论 六味地黄汤可通过抑制DCs的Notch信号通路活化,减少CD4+T细胞分化,进而缓解EAE残疾症状.
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