小鼠LIGHT胞外段基因原核表达质粒的构建及表达

来源 :免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：suc

【摘要】

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目的构建含有HGHT胞外段的原核表达载体，并在大肠杆菌中诱导表达。方法从由小鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞中提取总RNA，经RT-PCR扩增HGHT胞外段，克隆至原核表达载体pET-24a（＋）中，构

【作者】

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张亚丽江文正樊燕钱旻

【机构】

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华东师范大学生命科学学院

【出处】

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免疫学杂志

【发表日期】

：

2008年4期

【关键词】

：

LIGHT 基因克隆原核表达 LIGHT Gene cloning Prokaryotic expression

【基金项目】

：

上海市青年科技启明星计划资助项目（06QA14017）

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目的构建含有HGHT胞外段的原核表达载体，并在大肠杆菌中诱导表达。方法从由小鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞中提取总RNA，经RT-PCR扩增HGHT胞外段，克隆至原核表达载体pET-24a（＋）中，构建重组表达质粒pET24-LIGHTECD重组质粒经酶切鉴定及序列测定后，转化E．coliBL21，1VIG诱导表达，并用SDS-PAGE和Western blot进行检测。结果RT-PCR扩增出了525bpHGHT胞外段的cDNA，经测序证实其序列正确。SDS-PAGE和Western blot分析证实重组质

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