观察7,8-二羟基黄酮（7,8-DHF）对缺氧诱导的人近端肾小管上皮细胞内质网应激（ERS）损伤的影响，并探讨其可能的分子机制。

体外培养人近端肾小管上皮细胞（HK-2），采用缺氧培养箱建立细胞缺氧损伤模型，排除含血清培养基对缺氧的影响后，实验分为5组，分别为缺氧0 h、4 h、8 h、12 h、16 h组。实时荧光定量PCR（RT-PCR）法筛选缺氧诱导ERS的最佳缺氧时间。用不同浓度（50、100、150、200、250 μmol/L）7,8-DHF处理HK-2细胞,采用细胞增殖与活性实验筛选7,8-DHF的安全浓度。用7,8-DHF预处理HK-2细胞缺氧模型，按以下处理因素分组：对照组、缺氧+DMSO组、缺氧+7,8-DHF组（包括100 μmol/L组和150 μmol/L组），通过检测细胞增殖与活性筛选最佳给药浓度。后将细胞随机分为缺氧组、缺氧+7,8-DHF组（100 μmol/L），Western印迹法检测细胞蛋白激酶（Akt）、磷酸化蛋白激酶（p-Akt）、富含半胱氨酸蛋白61（Cyr61）、ERS相关促凋亡蛋白CCAAT增强子结合蛋白（CHOP）的表达。用重组Cyr61慢病毒载体构建稳定表达Cyr61蛋白的Cyr61-HK-2细胞株进行缺氧实验，按如下处理因素分组：缺氧+空质粒转染组，缺氧+Cyr61过表达组，膜连蛋白V和碘化丙啶（Annexin V-FITC/PI）染色后，采用流式细胞仪检测细胞凋亡，Western印迹法检测Cyr61和CHOP蛋白的表达情况。

（1）与对照组细胞相比，RT-PCR实验结果显示12 h为诱导ERS的最佳缺氧时间（P<0.01）。（2）与对照组相比，细胞增殖与活性实验结果显示100 μmol/L的7,8-DHF组为最佳给药浓度（P<0.01）。（3）与缺氧+DMSO组相比，缺氧+7,8-DHF细胞p-Akt、Cyr61表达量均明显增加，CHOP表达量明显降低（均P<0.05）；LY294002处理可抑制p-Akt的表达，减少Cyr61及增加CHOP的表达（均P<0.05）。（4）与缺氧+空质粒转染组相比，过表达Cyr61组细胞的凋亡率明显降低；Cyr61表达量明显增加，CHOP表达量明显降低（P<0.01）。

缺氧可诱导HK-2细胞发生ERS，7,8-DHF可能通过激活Akt通路上调Cyr61，阻止ERS下游凋亡蛋白CHOP的活化，抑制细胞凋亡以及减轻缺氧诱导的HK-2细胞损伤，提示7,8-DHF可能对AKI发挥保护作用。