藏鸡源乳酸菌的筛选鉴定及IBVN基因的表达研究

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从藏鸡(海拔3000米藏区、自然放养、未使用过抗生素)肠道内筛选乳杆菌,经16s rDNA和生理生化试验鉴定为植物乳杆菌.通过耐酸耐胆汁试验和肠道黏附试验测试,表明其具有良好的耐酸耐胆汁能力和肠道黏附能力.为使外源质粒顺利转化入乳杆菌,进行电场强度的优化,再按照优化后的电场强度,将禽冠状病毒pSIP409-N重组质粒电转化入该株乳杆菌,进行双酶切和PCR鉴定.将经鉴定成功转入的重组乳杆菌,用诱导肽SppIP诱导表达,再进行SDS-PAGE检测外源蛋白的表达.结果表明N蛋白能够顺利表达.上述试验证明该株植物乳杆菌具有作为乳酸菌活载体疫苗的潜力.
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