【摘 要】
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目的 观察新型二氢卟吩类光敏剂N-二氢卟吩e6三葡甲氨盐(N-chlorin e6 triglumine,简称KAE)介导的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)对宫颈癌HeLa细胞的体外杀伤效应,并与临床常用光敏剂血卟啉衍生物(Hematoporphyrin derivatives,HpD)介导的光动力疗法(HpD-PDT)的效应进行比较.方法 (1)采用紫外可见分光光度计检测光敏剂KAE和HpD分别在磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS)和含1
【机 构】
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解放军医学院 北京市,100853;中国人民解放军总医院第一医学中心激光医学科;中国人民解放军总医院第一医学中心激光医学科;北京理工大学医工融合研究院;解放军医学院 北京市,100853;中国人民解放
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目的 观察新型二氢卟吩类光敏剂N-二氢卟吩e6三葡甲氨盐(N-chlorin e6 triglumine,简称KAE)介导的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)对宫颈癌HeLa细胞的体外杀伤效应,并与临床常用光敏剂血卟啉衍生物(Hematoporphyrin derivatives,HpD)介导的光动力疗法(HpD-PDT)的效应进行比较.方法 (1)采用紫外可见分光光度计检测光敏剂KAE和HpD分别在磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS)和含10％胎牛血清的DMEM中的吸收光谱;(2)采用荧光分光光度计检测KAE与HeLa细胞孵育不同时间后的荧光强度,将荧光最高峰的数值作为衡量HeLa细胞内KAE含量的指标;(3)根据不同浓度KAE或HpD介导的光动力疗法处理后HeLa细胞的存活率拟合曲线方程并计算半数抑制浓度(50％ inhibitory concentration,IC50),用以评估KAE-PDT和HpD-PDT对HeLa细胞的杀伤效率.结果 (1)吸收光谱结果:KAE在可见光范围内主要有两个吸收峰,其中主吸收峰在400 nm附近,次吸收峰位于红光区内660 nm附近.在PBS和含有10％胎牛血清的DMEM溶液的峰值波长分别为654.5 nm、657.5 nm.HpD在可见光范围内的主吸收峰在400 nm左右,在红光区内的次吸收峰较弱.(2)HeLa细胞对KAE吸收特点检测结果,HeLa细胞对KAE的吸收量在孵育的前4h内迅速增加,其后呈缓慢增加趋势.(3)细胞杀伤效果,在本实验所选浓度范围内,KAE-PDT和HpD-PDT对HeLa细胞的杀伤作用均随着光敏剂孵育浓度升高而增强,KAE-PDT杀伤HeLa细胞的IC50值为1.3 μg/mL;HpD-PDT杀伤HeLa细胞的IC50值为2.85 μg/mL.结论 新型二氢卟吩类光敏剂KAE在红光区的吸收峰(约660 nm)与临床常用光敏剂HpD(约630 nm)相比红移较为明显,KAE-PDT对HeLa细胞的体外杀伤效力强于HpD-PDT.
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