【摘 要】
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目的探讨非竞争性N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂美金胺对缺血诱导未成熟脑白质内谷氨酸异常信号传输的体内外阻断效果。方法制备2日龄新生大鼠少突胶质细胞(OL)前体氧糖剥夺(OGD)细胞模型，分为对照组、OGD组及美金胺组。应用高效液相色谱仪测定OL前体胞外谷氨酸水平，流式细胞仪检测胞内钙离子浓度和OL前体凋亡率。制备缺血型脑室周围白质软化(PVL)动物模型，分为假手术组、PVL组及美金胺
【机 构】
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上海交通大学医学院附属新华医院儿童呼吸科 200092,上海交通大学医学院附属新华医院儿童呼吸科 200092,上海市儿科医学研究所围产研究室 200092,上海市儿科医学研究所围产研究室 20009
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目的探讨非竞争性N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂美金胺对缺血诱导未成熟脑白质内谷氨酸异常信号传输的体内外阻断效果。
方法制备2日龄新生大鼠少突胶质细胞(OL)前体氧糖剥夺(OGD)细胞模型，分为对照组、OGD组及美金胺组。应用高效液相色谱仪测定OL前体胞外谷氨酸水平，流式细胞仪检测胞内钙离子浓度和OL前体凋亡率。制备缺血型脑室周围白质软化(PVL)动物模型，分为假手术组、PVL组及美金胺组。分别进行光镜下脑白质病理评估、免疫组织化学法检测脑白质髓鞘碱性蛋白(MBP)阳性OL表达率及电镜下进行脑白质髓鞘形成状况评估。
结果体外与对照组相比，OGD组OL前体胞外谷氨酸水平增高[(24.60±2.42) μmol/L比(9.49±1.08) μmol/L，t＝9.28，P<0.01]，胞内钙离子浓度显著增加[(32.9±6.9)%比(6.9±3.5)%，t＝4.41，P<0.01 ]，OL前体凋亡率亦明显增高[(24.77±2.05)%比(6.65±1.39)%，t＝15.01，P<0.01 ]。经美金胺处理后，胞外谷氨酸水平[(14.70±1.70) μmol/L]、胞内钙离子浓度[(23.1±2.0)% ]和OL前体凋亡率[(11.80±2.06)%]均显著降低，差异均有统计学意义(t＝5.68、6.13、5.18，均P<0.01)。体内与假手术组相比，PVL组大鼠脑白质均呈中至重度病变，脑白质内MBP阳性OL表达率[(5.94±1.37)%比(15.40±3.22)%，t＝4.63，P<0.01]明显降低，髓鞘数目(4.00±1.00比14.67±2.70，t＝6.11，P<0.01)明显减少，髓鞘厚度[ (33.83±3.21) nm比(79.67±6.45) nm，t＝10.43，P<0.01]明显变薄。予美金胺处理后，脑白质病理(Z＝88.479，P<0.01)、髓鞘数目(10.30±1.50，t＝6.01，P<0.01)及髓鞘厚度[(57.21±4.05) nm，t＝7.47，P<0.01]均显著改善，脑白质内MBP阳性OL表达率[(11.02±1.35)%，t＝4.40，P<0.05]亦明显增高。
结论缺血诱导未成熟脑白质内谷氨酸异常信号传输是发生缺血性PVL的重要途径，美金胺可有效阻断此异常信号传输，有望为早产儿缺氧缺血PVL的防治提供新途径。
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