模拟微重力下瘦素对肺T淋巴细胞的信号转导途径MAPK/ERK影响

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目的探讨在模拟微重力下瘦素对肺T淋巴细胞MAPK/ERK信号转导途径及增殖影响。方法分离肺T淋巴细胞,利用旋转式细胞组织培养系统(RCCS,即旋转生物反应器)模拟微重力条件。培养T淋巴细胞后,采用蛋白印迹(Western blot)法检测T淋巴细胞磷酸化的ERK和总的ERK蛋白的表达;免疫组织化学染色观察T淋巴细胞表达c-fos;四甲基偶氮唑蓝(MTT)微量比色法测定T淋巴细胞的增殖反应。结果在普通细胞培养容器组,ConA组与瘦素组、ConA+瘦素组与ConA组相比,磷酸化的ERK蛋白量、c-fos免疫组化染色阳性细胞百分比和淋巴细胞的增殖反应增加(P<0.01),总的ERK蛋白量不变;模拟微重力条件下,与普通细胞培养容器培养的T淋巴细胞相比较,ConA刺激后磷酸化的ERK蛋白量表达减少,总的ERK蛋白量不变,T淋巴细胞的增殖反应降低(P<0.01);瘦素组与ConA组的相同指标相比,上述指标无明显变化,而且加入瘦素的ConA组再与ConA组比较指标仍无明显变化。旋转生物反应器组中的ConA+瘦素组,与普通细胞培养容器组中的ConA+瘦素组相比较,上述指标除总的ERK蛋白量外均降低,有显著差异(P<0.01);且在模拟微重力条件下,瘦素组及ConA+瘦素组的上述所有指标与同样条件下的ConA+PMA组相比均降低(P<0.01)。结论模拟微重力条件下,T淋巴细胞除总的ERK蛋白的量外,磷酸化的ERK、表达c-fos染色阳性细胞百分比、淋巴细胞的增殖反应均降低。模拟微重力条件下,瘦素组及ConA+瘦素组,上述所有指标与同样条件下的ConA+PMA组相比均降低(P<0.01),提示PMA对T淋巴细胞的上述指标有部分恢复作用。
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