【摘 要】
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目的 探讨小干扰RNA( siRNA)沉默HOXA9基因对人类急性单核细胞白血病U937细胞株增殖、凋亡的影响.方法 设计合成针对HOXA9的特异性siRNA寡核苷酸链,应用阳离子脂质体介导瞬时转染U937细胞.实验分为3组:实验组(脂质体转染靶向HOXA9的siRNA)、阴性对照组(脂质体转染阴性对照siRNA)和细胞对照组(仅加等量细胞及培养液).利用反转录-聚合酶链反应法、Western b
【机 构】
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目的 探讨小干扰RNA( siRNA)沉默HOXA9基因对人类急性单核细胞白血病U937细胞株增殖、凋亡的影响.方法 设计合成针对HOXA9的特异性siRNA寡核苷酸链,应用阳离子脂质体介导瞬时转染U937细胞.实验分为3组:实验组(脂质体转染靶向HOXA9的siRNA)、阴性对照组(脂质体转染阴性对照siRNA)和细胞对照组(仅加等量细胞及培养液).利用反转录-聚合酶链反应法、Western blot法分别检测各组细胞HOXA9mRNA、蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 转染靶向HOXA9的siRNA后,实验组、阴性对照组、细胞对照组mRNA相对表达水平分别为(22.980±0.548)％、(82.371±1.517)％、(84.637±2.252)％(P＜0.05),蛋白相对表达水平分别为( 50.377±2.773)％、(102.275±3.898)％、(107.510±3.905)％(P＜ 0.05):siRNA转染后实验组U937细胞增殖明显受抑制且细胞凋亡率显著增高,24、48、72 h增殖抑制率分别为( 41.909±4.333)％、(54.470±3.756)％、(65.835 ± 1.024)％,凋亡率为(26.800±2.081)％,与细胞对照组、阴性对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 靶向HOXA9的siRNA可有效沉默U937细胞HOXA9基因表达,明显抑制细胞的增殖并促进细胞凋亡,为临床白血病HOXA9基因靶向治疗提供了实验依据。
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