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【目的】建立苹果DNA纤维荧光原位杂交（Fiber FISH）技术体系，从而为利用该技术确定苹果基因组DNA序列间的位置关系、构建精细物理图谱等方面的应用奠定基础。【方法】以‘Florina’苹果幼叶为试材，通过液氮研磨，尼龙膜过滤和TritonX-100去除叶绿素等步骤提取细胞核。细胞核经碱裂解，采用盖玻片拉伸方法制备DNA纤维。比较细胞核不同裂解时间和在5种不同包被类型的载玻片上DNA纤维拉伸的效果。用碱裂解方法提取来自苹果‘Florina’自交不亲和S9基因座的4个细菌人工染色体（Bacterium