小鼠睾丸精子细胞的分离与鉴定

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目的:建立一种简单、可有效分离小鼠睾丸精子细胞的方法。方法:用组合酶消化成年小鼠睾丸制备睾丸细胞悬液,然后经6层非连续Percoll梯度(15%、22%、40%、50%和60%)离心法分离,通过形态学和流式细胞术鉴定各个Percoll梯度中精子细胞的含量,并以伊红Y排斥试验测定细胞的存活率。结果:组合酶消化后获得的睾丸细胞悬液中,97%以上细胞仍然存活。经Percoll梯度离心,共形成6条细胞带,其中22%梯度中主要精子细胞(平均86.7%,p<0.05),85.5%以上细胞存活;而30%梯度中细胞
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