α7亚基烟碱乙酰胆碱受体在右美托咪定防治内毒素血症小鼠谵妄中的作用

来源 :中华危重病急救医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chaoshi648
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目的

观察α7亚基烟碱乙酰胆碱受体(α7nAChR)在右美托咪定(DEX)防治内毒素血症谵妄发生中的作用,并探讨其作用机制。

方法

将100只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组(NS组)、DEX对照组、脂多糖(LPS)诱导内毒素血症模型组(LPS组)、DEX保护组(DEX+LPS组)、α-银环蛇毒素拮抗组(α-BGT+DEX+LPS组),每组20只。采用腹腔注射LPS 20 mg/kg制备内毒素血症模型,NS组和DEX对照组给予等量生理盐水。DEX对照组、DEX+LPS组和α-BGT+DEX+LPS组小鼠于制模前15 min腹腔注射DEX 40 μg/kg,α-BGT+DEX+LPS组于注射DEX前15 min腹腔注射α7nAChR抑制剂α-BGT 1 μg/kg;NS组给予等量生理盐水。制模前及制模后24 h每组取10只小鼠进行旷场实验,实验结束后处死小鼠留取标本,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平,蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测海马组织胆碱乙酰转移酶(ChAT)及乙酰胆碱酯酶(AChE)表达量。另取10只小鼠行新物体识别实验,观察训练阶段探究总时间及制模后3 h和24 h的偏好指数。

结果

NS组和DEX对照组各项指标比较差异均无统计学意义。① 旷场实验结果显示,制模前各组旷场实验观察指标均无差异。制模后24 h,与NS组比较,LPS组小鼠表现为对新环境的认知、学习和记忆能力均下降,紧张度增加;DEX可明显改善小鼠的上述变化;而α-BGT可部分拮抗DEX对谵妄小鼠的保护作用。② 新物体识别实验结果显示,与NS组比较,LPS组小鼠探究新事物的能力下降;DEX可改善小鼠的探究能力;而α-BGT可拮抗DEX的保护作用。③ ELISA结果显示,LPS组血清TNF-α和NSE水平较NS组明显升高,DEX可抑制LPS诱导的血清TNF-α和NSE水平升高,而α-BGT可拮抗DEX的保护作用〔NS组、LPS组、DEX+LPS组、α-BGT+DEX+LPS组TNF-α(ng/L)分别为23.72±3.13、808.78±87.86、192.96±31.47、829.99±80.98,NSE(μg/L)分别为8.70±0.74、25.90±3.03、18.10±2.14、23.12±2.21,均P<0.01〕。④ Western Blot结果显示,与NS组比较,LPS组海马组织ChAT表达明显下降,AChE表达明显升高,DEX可逆转ChAT和AChE的表达变化,而α-BGT可拮抗DEX的保护作用〔NS组、LPS组、DEX+LPS组、α-BGT+DEX+LPS组ChAT(灰度值)分别为1.536±0.150、0.381±0.138、0.914±0.173、0.628±0.088,AChE(灰度值)分别为0.382±0.201、1.843±0.325、0.898±0.155、1.470±0.220,P<0.05或P<0.01〕。

结论

内毒素血症小鼠可发生谵妄等认知功能障碍;DEX可通过调节脑内神经递质AChE和ChAT的表达量而改善谵妄症状,从而起到脑保护作用,其机制可能与α7nAChR有关。

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