【摘 要】
：
目的 构建HCBP6及HCBP6不同位点模拟磷酸化的绿色荧光蛋白重组质粒,明确其亚细胞定位.方法 以构建含有570 bp的HCBP6外显子基因的绿色荧光蛋白重组质粒为基础,应用快速定点突变技术构建HCBP6不同位点模拟磷酸化的重组质粒.将重组质粒测序并进行序列比对.利用jetPRIME转染体系将HCBP6及HCBP6不同位点模拟磷酸化的重组质粒转染至细胞中,应用Real-Time PCR技术检测目的基因mRNA的表达,应用Western blot技术检测目的基因蛋白表达,应用荧光显微镜观察HCBP6不同位
【机 构】
：
西安交通大学第一附属医院 营养科,西安 710061;西安交通大学第一附属医院 感染科,西安 710061;天津市第五中心医院 呼吸科,天津300450;首都医科大学附属北京地坛医院 传染病研究所,北
论文部分内容阅读
目的 构建HCBP6及HCBP6不同位点模拟磷酸化的绿色荧光蛋白重组质粒,明确其亚细胞定位.方法 以构建含有570 bp的HCBP6外显子基因的绿色荧光蛋白重组质粒为基础,应用快速定点突变技术构建HCBP6不同位点模拟磷酸化的重组质粒.将重组质粒测序并进行序列比对.利用jetPRIME转染体系将HCBP6及HCBP6不同位点模拟磷酸化的重组质粒转染至细胞中,应用Real-Time PCR技术检测目的基因mRNA的表达,应用Western blot技术检测目的基因蛋白表达,应用荧光显微镜观察HCBP6不同位点磷酸化质粒的亚细胞定位.结果 将测序的重组序列与目的基因进行比对,发现重组序列与目的基因完全一致,说明HCBP6不同位点模拟磷酸化的重组质粒构建成功.Real-Time PCR和Western blot表明,与对照组相比,实验组高表达HCBP6及HCBP6不同位点模拟磷酸化的基因.免疫荧光显微镜可见10Ala主要在细胞质表达,WT、10Asp、151Ala、151Asp主要在细胞核表达.结论 构建的HCBP6及HCBP6不同位点模拟磷酸化的重组质粒可成功转染细胞并在细胞中高表达,HCBP6不同位点磷酸化质粒亚细胞定位不同.
其他文献
目的 探究导乐陪伴分娩对初产妇自然分娩产程时间及产后生活质量的影响.方法 选取的80例产妇均为厦门市中医院2020年2月—2021年2月所收治,以随机数字表法将其分为观察组(导乐陪伴分娩)与对照组(常规护理)各40例,探讨实施不同护理对产程时间及产后生活质量的影响.结果 观察组第一产程时间(339.50±33.11)min、第二产程时间(18.73±1.85)min、第三产程时间(9.75±0.95)min及总产程时间(371.98±37.92)min均比对照组[(373.25±37.89)min、(26
提高政治判断力、政治领悟力、政治执行力,是习主席着眼实现中华民族伟大复兴的战略全局和百年未有之大变局向全党发出的重大而严肃的政治号召,是不断增强“四个意识”、坚定“四个自信”、做到“两个维护”,贯彻军委主席负责制的必然要求.党员干部必须深刻理解把握政治“三力”的内涵实质、逻辑关系、法纪依据,切实在增强政治意识、锤炼政治能力、强化政治实践上下功夫见成效.
地方性氟中毒是一种常见的生物地球化学性疾病。目前氟中毒的病因虽已明确,但其分子机制尚不完全清楚,所以迄今为止,尚无有效治疗氟中毒的具体方法,多以预防为主。近年来,大量研究证实,钙、镁、磷等常量元素和硒、硼等微量元素在氟中毒的发生发展过程中起到了积极的调控作用,在机体拮抗氟中毒过程中发挥着不同程度的影响,而高水平的砷、铅、铝、铬等微量元素是氟中毒的危险因素。鉴于多种常量与微量元素在人体营养和健康中的重要性,文中对多种元素与氟中毒尤其是氟骨症和氟斑牙的最新研究进展进行综述,为进一步了解氟致健康损害的原因,有针
肩关节稳定结构损伤或发育不良,失去维持正常关节稳定能力,肱骨头相对肩胛盂出现有症状的异常活动称为肩关节不稳定,以复发性和有症状(疼痛、恐惧、错动感等)为特征,包括复发性脱位和半脱位.创伤性肩关节脱位是肩关节不稳定最常见原因,一次脱位不等于不稳定,有13％～53％的初次脱位会出现肩关节不稳定[1].肩关节是人体脱位最多的关节,占所有关节脱位的50％,其中前脱位95％、后脱位2％～4％、下脱位0.5％[2].
智能手机管控难的问题长期困扰基层、影响安全稳定、制约部队发展,围绕如何管好智能手机、过好新时代网络关,结合调研,我们进行了一些思考和实践.总的感到,在上级三令五申、越严越紧的大形势大背景下,部队智能手机管控总体向上向好,但一些破矩踩线的问题还是屡禁不止,需要立根治源、抓长抓常,确保手机管控真正严在格内、管在理上、制在度中.
目的 探讨应用精细化防控措施降低中心静脉导管相关血流感染(CRBSI)的效果.方法 选取某三级甲等医院2019年1月—2020年12月中心静脉置管≥48 h的患者.2019年1—12月为干预前期,2019年12月底全院开始实施精细化防控措施,2020年1—12月为干预后期.比较干预前后医务人员CRBSI防控措施执行率和患者CRBSI发病率.结果 2020年医务人员CRBSI防控措施执行率为99.06％(191504/193324),高于2019年的87.90％(382550/435194),差异有统计学意
党的十八大以来,国防动员系统在习近平强军思想引领下,实现了改革转型、体系重塑,党的领导和党的建设不断加强,全面从严治党取得重大成果,但国防动员系统独有特点对党委加强党员干部教育管理提出了新要求、新举措.
慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)是我国重要的公共卫生问题.目前,核苷(酸)类似物[nucleos(t)ide analogs,NAs]是抗病毒治疗的一线用药,其长期服用的安全性问题也引起了临床医师的广泛关注.有研究表明,NAs抗病毒治疗可能影响脂质代谢,不同药物对脂质代谢的影响不同,脂质代谢又与CHB的疾病进展密切相关.因此谨慎评价NAs对脂质代谢的影响及其临床相关性具有重要意义.
今年初,驻地突发较大规模疫情,这是全国首次正面迎战“奥密克戎”变异毒株,较短时间内感染人数达400余人,13余万人被封控,近2万人被转移隔离,加之紧邻首都、临近冬奥,防控形势异常严峻、紧迫、复杂.警备区第一时间抽调精干力量组建前进指挥所进驻一线,协调安排现役官兵、专武干部和民兵3万多人次,有序有效完成了物资运输、核酸检测保障、登门入户排查、社区警戒执勤等任务,充分发挥了生力军和突击队作用,成为抗疫一线一张亮丽的名片,得到地方党委政府和人民群众高度赞誉.这次行动,既是“硬刚”病毒的战场,也是考察识别干部的考
打仗硬碰硬,训练必须实打实.军事训练实际上是未来战争的预演,是提高实战能力的重要途径和抓手,要坚定不移地把军事训练摆在战略位置.作为中心工作,强化战训一致思想,从实战需要出发从难从严训练部队,坚持仗怎么打兵就怎么练、打仗需要什么就苦练什么、部队最缺什么就专攻精练什么.我们要做好万全的准备、随时奔赴战场的准备,容不得半点取巧和投机.