【摘 要】
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为建立表达小鼠Fas配体(mFasL)的内部核糖体进入位点(IRES)串联的双顺反子新型逆转录病毒基因转移体系,用基因重组技术将mFasL cDNA基因构建到IRES双顺反子逆转录病毒载体(PL
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病学研究所,武汉大学医学院附属人民医院儿科
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为建立表达小鼠Fas配体(mFasL)的内部核糖体进入位点(IRES)串联的双顺反子新型逆转录病毒基因转移体系,用基因重组技术将mFasL cDNA基因构建到IRES双顺反子逆转录病毒载体(PLXIN)中,脂质体法将此重组质粒PLFIN和空载体PLXIN分别转染包装细胞(PA317),经G418筛选出抗性包装细胞克隆,基因组DNA PCR测定基因整合情况.并将抗性PA317克隆培养上清感染小鼠成纤维细胞系(NIH3T3),筛选出高滴度的PA31 7细胞系;用流式细胞术测定筛选的NIH3T3细胞目的基因表达
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