骨肉瘤血管内皮细胞特异性结合短肽的体内功能验证

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目的 验证骨肉瘤血管内皮细胞(osteosarcoma-associated vascular endothelial cells,OAVECs)特异性结合肽(TKPDKGY)对荷瘤裸鼠模型体内OAVECs的亲和性.方法 合成短肽(TKPD-KGY)并在其N端加载一个异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC),纯化后将短肽荧光复合物注入荷瘤裸鼠血管内,通过小动物整体荧光成像来观察短肽在活体动物内的分布,同时定时处死裸鼠,切取重要器官和肿瘤制冰冻切片,使用激光共聚焦显微镜扫描来评价短肽在体内与OAVECs的亲和性.结果 小动物整体荧光成像显示荷瘤裸鼠注射FTTC-TKPDKGY 10 min后,肿瘤处即可见微弱荧光富集,30min时显示明显并逐渐增强,1h后达最强,4 h后逐渐消退,至24 h基本无荧光残留.激光共聚焦扫描可见肿瘤血管和血管丛荧光强度较强,肿瘤组织仅见少量短肽结合,可提示有一定的结合性.心、脑、肺和肝组织显示并不明显.肾脏镜下可见肾血管并无荧光显像,但肾小球和肾小管部可见荧光富集,提示短肽在此代谢.结论 TKPDKGY对目标细胞有良好的靶向性,为短肽进一步结合效应分子应用于骨肉瘤的诊断和治疗奠定一定的实验基础。

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