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【目的】构建禽呼肠孤病毒（ARV）S1133σ3基因的真核重组质粒，研究其表达蛋白的免疫原性，为研发ARV基因疫苗奠定基础。【方法】采用RT—PCR对ARVS1133毒株的盯3基因进行RT—PCR扩增，扩增产物与真核表达载体pcDNA3．1（＋）连接后，转化大肠杆菌DH5（x，然后提取重组质粒的DNA，经双酶切、PCR扩增鉴定和纯化。以阳性重组质粒pcDNA3．1一（r3免疫7日龄SPF雏鸡，同时设灭活S1133、表达盯3蛋白及生理盐水对照，二次加强免疫两周后，采用Westernblotting检测鸡群血