【摘 要】
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目的从猪带绦虫六钩蚴总RNA中扩增45WB2基因,并在甲醇酵母分泌表达载体pPIC9K中获得高效表达.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),从孵化激活的六钩蚴克隆获得459 bp的基因
【机 构】
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中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学重点实验室,中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学重点实验室,新疆农业大学化工学院
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目的从猪带绦虫六钩蚴总RNA中扩增45WB2基因,并在甲醇酵母分泌表达载体pPIC9K中获得高效表达.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),从孵化激活的六钩蚴克隆获得459 bp的基因,亚克隆至酵母分泌表达载体pPIC9K中,经测序验证读码框正确后,重组质粒电转化毕赤酵母SMD1168菌株.用PCR方法检测结果表明,目的基因整合进毕赤酵母染色体DNA中.重组菌株用1%甲醇诱导,分别取诱导72和96 h的上清和沉淀进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western
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