【摘 要】
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目的 :探讨靶向信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT 3)基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人子宫内膜癌HEC-1B
【机 构】
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南昌大学第二附属医院妇产科,江西省医学分子重点实验室,南昌大学附属第一医院骨科,江西省妇幼保健院产前诊断科,
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目的 :探讨靶向信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT 3)基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人子宫内膜癌HEC-1B细胞生物学行为的影响。方法 :将化学合成的靶向STAT 3基因的siRNA片段(si-STAT3)转染至HEC-1B细胞,实时荧光定量-PCR法检测转染后细胞中STAT3 mRNA的表达,CCK-8(cell counting kit-8)法检测细胞的增殖活性,FCM法检测细胞周期和细胞凋亡,Transwell小室法检测细胞的迁移和侵袭,蛋白质印迹法检测细胞中STAT3、磷酸化STAT3及其下游细胞周期蛋白D2(cyclin D2,CCND2)和基质金属蛋白酶2(metalloproteinase-2,MMP-2)蛋白的表达。结果 :与空白对照组(HEC-1B细胞中仅加入脂质体)或转染对照干扰片段(si-control)组比较,转染si-STAT3后的HEC-1B细胞中STAT3 mRNA的表达水平明显降低(P<0.01),细胞的增殖活性明显下降(P<0.01),G1期细胞所占比例上升,S期细胞所占比例下降(P<0.01),细胞早期凋亡率明显升高(P<0.01),细胞的迁移和侵袭能力明显下降(P<0.01),HEC-1B细胞中STAT3、磷酸化STAT3及其下游CCND2和MMP-2蛋白的表达水平明显下调(P<0.01)。结论 :靶向STAT 3基因的特异性si-RNA片段能够下调HEC-1B细胞中STAT3mRNA及其蛋白的表达,抑制HEC-1B细胞的增殖、侵袭和迁移,并诱导其凋亡。
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