【摘 要】
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目的 研究骨髓间充质干细胞外泌体(BMSCs-exo)对高血压大鼠血管内皮的影响及机制.方法 体外分离培养获取大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),诱导形成BMSCs-exo.选取12周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)40只,随机分为BMSCs-exo组(10只)、对照组(10只)、miR-132-3p高表达组(10只)、miR-132-3p空载组(10只),另选取雄性WKY大鼠为健康组(10只).BMSCs-exo组予以尾静脉注射BMSCs-exo,每次30μg,隔日1次,连续注射7次;miR-132-3
【机 构】
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郑州大学附属郑州中心医院 郑州 450007
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目的 研究骨髓间充质干细胞外泌体(BMSCs-exo)对高血压大鼠血管内皮的影响及机制.方法 体外分离培养获取大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),诱导形成BMSCs-exo.选取12周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)40只,随机分为BMSCs-exo组(10只)、对照组(10只)、miR-132-3p高表达组(10只)、miR-132-3p空载组(10只),另选取雄性WKY大鼠为健康组(10只).BMSCs-exo组予以尾静脉注射BMSCs-exo,每次30μg,隔日1次,连续注射7次;miR-132-3p高表达组与miR-132-3p空载组分别以miR-132-3p高表达慢病毒颗粒和空载体慢病毒颗粒尾静脉注射,每次0.1 mL,3 d注射1次,至BMSCS-exo组干预结束;健康组、对照组以同法注射生理盐水.末次干预后采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组miR-132-5p表达变化.测量各组大鼠尾动脉收缩压,检测血清内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、血栓素B2(TXB2)、前列环素(PGI2)水平.结果 倒置显微镜下观察,BMSCs形态从圆形逐渐向梭形或多角形生长,流式细胞术鉴定BMSCs表面抗原符合生物学特征.透射电镜及蛋白印迹法验证提取的囊泡状物质为外泌体.与对照组比较,BMSCs-exo组、miR-132-3p高表达组miR-132-3p相对表达量升高(P<0.05);与BMSCs-exo组比较,miR-132-3p高表达组miR-132-3p相对表达量升高(P<0.05),miR-132-3p空载组相对表达量降低(P<0.05);与对照组比较,BMSCs-exo组、miR-132-3p高表达组尾动脉收缩压、血浆ET-1及TXB2水平降低,血浆NO、PGI2水平升高(P<0.05);与BMSCs-exo组和miR-132-3p高表达组比较,miR-132-3p空载组尾动脉收缩压、血浆ET-1及TXB2水平升高,血浆NO、PGI2水平降低(P<0.05).对照组大鼠胸主动脉血管壁增厚、管腔狭窄,动脉壁中层平滑肌细胞肥大,细胞结构排列紊乱;BMSCs-exo组、miR-132-3p高表达组病理变化较对照组轻,但BMSCs-exo组与miR-132-3p高表达组病理变化相当.结论 BMSCs-exo能降低高血压大鼠血压,改善血管内皮功能,抑制血管病理变化,其机制可能与提高miR-132-3p的表达有关.
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