改变毕赤酵母信号肽对人三叶因子3表达的影响

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为了表达具有天然N-末端的人三叶因子3,构建了含两种信号肽序列的毕赤酵母表达载体,其中一种表达载体在分泌信号肽序列a-factor后保留STE13信号肽切割序列,另一种表达载体去除了该序列.将2种表达载体分别转化到毕赤酵母GS115中进行表达.经甲醇诱导后目的蛋白分泌到发酵液上清中,SDS-PAGE和Western印迹证明2种重组蛋白均以二体的形式分泌表达,分子质量约为13ku,都能被TFF3抗体所识别.N-端氨基酸测序证明其中一个重组蛋白具有天然人TFF3的N端,质谱检测分子质量与天然蛋白一致;另一重组
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