探讨Smad3特异性抑制剂(SIS3)逆转多药耐药肝癌细胞的干性作用。

采用阿霉素(ADM)浓度梯度递增诱导法，诱导亲本细胞，建立人肝癌多药耐药细胞系Huh7.5.1/ADM，采用CCK–8法检测化疗药物的敏感性，采用流式细胞仪检测干细胞表面标志物CD133的表达，采用平板克隆实验观察细胞集落的生长情况。采用裸鼠成瘤实验验证肝癌细胞的成瘤能力。Western blot检测CD133、Smad3、Bcl–2和Bax蛋白的表达。

应用ADM成功诱导建立的人肝癌多药耐药细胞Huh7.5.1/ADM具有肝癌干细胞特性。亲本Huh7.5.1细胞对ADM、长春新碱(VCR)、丝裂霉素(MMC)、环磷酰胺(CTX)的半数抑制浓度(IC₅₀)分别为(0.123± 0.004)μg/ml、(0.014±0.002)μg/ml、(0.071±0.006)μg/ml和(1.919±0.032)μg/ml，Huh7.5.1/ADM细胞的IC₅₀分别为(0.215± 0.018)μg/ml、(0.145±0.009)μg/ml、(1.021± 0.119)μg/ml和(27.007±1.606)μg/ml，差异均有统计学意义(均P<0.05)；SIS3处理后Huh7.5.1/ADM/SIS3细胞的IC₅₀分别为(0.112±0.019)μg/ml、(0.065±0.013)μg/ml、(0.749±0.121)μg/ml和(10.576±1.248)μg/ml，均低于Huh7.5.1/ADM细胞(均P<0.05)。Huh7.5.1/ADM细胞中CD133的表达率为(76.06±2.948)%，与亲本Huh7.5.1细胞[(25.38±4.349)%]和Huh7.5.1/ADM/SIS3细胞[(48.49±2.304)%]比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。SIS3抑制Smad3活性后，降低了克隆集落形成能力和体内裸鼠成瘤能力。

SIS3作为Smad3信号通路的特异性抑制剂，与多药耐药肝癌细胞的干性作用有关。